芦荟多糖的分离纯化及其硫酸酯化改性研究-有机化学专业论文.docxVIP

摘要目前分离芦荟多糖的方法存在耗能高、污染重等缺点，而双水相 摘要 目前分离芦荟多糖的方法存在耗能高、污染重等缺点，而双水相 体系做为一种新型的分离技术，具有分离条件温和、环境友好、易于 操作、分相时间短、成本低、目标产物分配系数大等优点。因此，根 据上述特点设计了一条新型的芦荟多糖分离体系，并分析了芦荟多糖 的单糖组成，研究了它的体外抗氧化性；同时合成了芦荟多糖硫酸酯， 并对芦荟多糖硫酸酯的体外抗氧化性进行了研究。 第一，选取曲拉通X．114双水相体系分离纯化芦荟多糖，采用苯 酚．硫酸法测定芦荟多糖在此体系的回收率及用考马斯亮蓝法测定蛋 白质在此体系中的回收率，讨论了曲拉通浓度、pH值、温度、无机 盐的添加量对体系相比、蛋白质回收率和芦荟多糖回收率的影响。研 究发现：当曲拉通X．114的浓度为4％，pH值为3，温度为50℃，添 加剂浓度为O．3 mol·L。1时，体系达到最佳的分离条件，能有效地分离 蛋白质和多糖。在曲拉通X．114的浓度为4％，pH值为3，温度为50 ℃，硫酸铵添加浓度为O．3 mol·L。1条件下处理芦荟凝胶汁，分离纯化 得到多糖的含量为85．72％，回收率为89．7％；其他条件不变，氯化 钠添加浓度为0．3 mol·L以条件下处理芦荟凝胶汁，分离纯化得到多糖 的含量为85％，回收率为99％。 第二，多糖的紫外扫描和红外光谱研究结果表明：芦荟多糖在红 外光谱中有典型的特征吸收，芦荟多糖在190．800 nnl范围内扫描所 得到的紫外可见光光谱图，在190．200 nm之间有一个强烈的吸收峰， 而在280 111TI蛋白质特征吸收处没有吸收峰，在260姗核酸特征吸收 处也没有吸收峰，从而可推测所得芦荟多糖中不含有蛋白质、核酸。 高效液相分析结果表明：双水相分离的芦荟多糖主要由甘露糖组成， 同时有少量的葡萄糖，不含半乳糖、木糖和果糖。 第三，研究了芦荟多糖的硫酸酯化改性，考查了氯磺酸与吡啶的 体积比、反应温度、反应时间的影响，通过L9(34)正交试验，优化酯 化条件为：氯磺酸与吡啶的体积比为l：3，反应温度为60℃，反应时 间是4 h；并且通过芦荟多糖和硫酸酯化后的芦荟多糖的红外对比发 现：在硫酸酯化的芦荟多糖中，1230 em-1．1260 cm。1处是磺酸基的伸 缩振动，815 cm‘1处是C．O．S的伸缩振动，说明多糖分子发生了酯化 反应，硫酸酯化使得多糖的结构发生了一定的变化，从而表现出更强 的生物活性。第四，通过对羟基自由基(·OH)及超氧阴离子自由基(02‘)的 的生物活性。 第四，通过对羟基自由基(·OH)及超氧阴离子自由基(02‘)的 清除作用，对比了醇提芦荟粗多糖、优化条件下双水相萃取的芦荟多 糖及硫酸酯化的芦荟多糖的体外抗氧化性；研究发现：抗氧化性从强 到弱依次为芦荟多糖硫酸酯、双水相纯化的芦荟多糖、醇提芦荟粗多 糖，并且对自由基的清除作用随着多糖浓度的增加而增大。 关键词：双水相体系，芦荟多糖，多糖硫酸酯，体外抗氧化性 Ⅱ ABSTRACTAt ABSTRACT At present，there are some disadvantages in the production process of aloe polysaccharides，such as higher energy consumption，pollution of used organic solvent and SO on．As a novel separation technique，aqueous two-phase system(ATPS)has many advantages such as easily being operated，shorter phase-separation time，lower investment cost，bigger separation coefficent and SO on．In this paper，a new type of separation system for aloe polysaccharide was designed，the component of aloe polysaccharide was analyzed and the inoxidizability was studied，in addition，the method of sulfating polysaccharide and the inoxidizability of sulfated polysaccharide were investigated． Firstly，a ATPS based on Triton X．1 1 4 was established．The aloe