药物的含量测定方法与验证培训课件.pptVIP

外标法特点： 1）不需要校正因子，不需要所有组分出峰 2）结果受进样量、进样重复性和操作条件影响大 →每次进样量应一致，否则产生误差 精品 例：醋酸氢化可的松的含量采用HPLC法测定：取本品对照品适量，精密称定，加甲醇定量稀释成每ml约含0.35mg的溶液。精密量取该溶液和内标溶液（0.30mg/ml炔诺酮甲醇溶液）各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10ul注入液相色谱仪，记录色谱图。另取本品适量，同法测定，按内标法计算含量。已知：对照品取样为36.2mg，样品取样为35.5mg，测得对照液中醋酸氢化可的松和内标的峰面积分别为5467824和6125843，样品液中药物和内标的峰面积分别为5221345和6122845，计算本品的含量 精品 概述 含金属与卤素药物须处理后进行测定。处理方法视结合牢固程度而异。卤素与芳环相连牢固；与脂肪族碳相连，结合不牢固。 含金属药物：金属不直接与碳相连为含金属的有机药物，不牢固，一般直接测定；金属与碳相连为有机金属药物，须适当处理。 第二节 定量分析样品前处理方法 不经有机破坏的分析方法 经有机破坏的分析方法 精品 1、直接测定法 金属元素不直接与碳原子相连的含金属有机药物或C-M键结合不牢的有机金属药物，在水溶液中可电离，不须破坏直接采用适当的方法测定 如葡萄糖酸钙中的钙离子-EDTA络合滴定 一、不经有机破坏的分析方法 精品 2、经（酸、碱）水解后测定法 方法原理（卤素）：将含卤素的有机药物溶于适当溶剂中，加氢氧化钠或硝酸银溶液加热回流使其水解，将有机结合的卤素，经水解作用转变为无机卤素离子，然后采用间接银量法测定。如三氯叔丁醇的测定。 间接银量法：定量加入过量的AgNO3 ，过量的硝酸银以硫氰酸铵为滴定剂，硫酸铁铵为指示剂滴定。 精品 CCl3-C(CH3)2-OH + 4NaOH △ 回流 (CH3)2-CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O NaCl + AgNO3 AgCl↓ + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN ↓ + NH4NO3 （淡棕红色） (Ksp=1.56×10–10 ) (Ksp=1.0×10-12 ) Fe3+ + SCNˉ Fe (SCN) 2+ 精品 3、经还原后测定法 碱性还原后测定 方法原理；在氢氧化钠和锌粉存在的条件下，有机药物（多用于含碘有机药物）加热回流，发生还原裂解反应，使有机结合的卤素（碘）转变为无机卤素离子（碘离子），继而采用间接银量法或其他方法进行测定，如泛影酸的测定。 适用范围：碘原子与苯环直接相连的药物。 精品 例 泛影酸的测定 取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于20.46mg的C11H9 I 3N2O4。 精品 C O O H I N H C O C H 3 I I H 3 C O C H N + 11NaOH + Zn 回流 △ C O O Na N H2 H2 N + 3NaI + 2CH3COONa + 2Na2ZnO2 + H2O 精品 酸性还原后测定法 方法原理；在醋酸和锌粉存在的条件下，有机药物（多用于含碘有机药物），发生还原裂解反应，使有机结合的卤素（碘）转变为无机卤素离子（碘离子），采用银量法测定卤素离子的含量。 精品 二、经有机破坏的分析方法 （一）、湿法破坏 硝酸-高氯酸法：破坏能力强，反应激烈，需防止爆炸。适用于生物样品的破坏，所得的无机金属离子为高价态。 硝酸-硫酸法：适用于与碳原子结合牢固的绝大多数含金属有机药物的破坏分解（但不适用于含碱土金属类有机药物），所得的无机金属离子为高价态。 硫酸-硫酸盐法：常用的硫酸盐为硫酸钾，所得的无机金属离子为低价态。常用于含砷或锑有机药物的破坏分析。 精品 凯氏定氮法-含氮有机药物定量分析方法 ?? 原理：常用凯氏定氮法测定天然有机物(如蛋白质、核酸及氨基酸等)的含氮量。含氮的有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、氢元素被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。浓碱可使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，借水蒸汽将产生的氨蒸馏到一定量的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后用标准无机酸滴定，最后根据所用标准酸的摩尔数计算出待测物中的总氮量。 精品 CH2NH2COOH+3H2SO4 2CO2+3SO