硫化氢对铀致大鼠肝肾毒性的保护作用-生物学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 硫化氢对铀致大鼠肝肾毒性的保护作用 论文作者签名: 指导教师签名: 论 文 评 阅 人 1 ： 唐小卿，教授，硕导，南华大学 评阅人 2： 曹运长，副教授，硕导，南华大学 答辩委员会主席： 吴移谋，教授，博导，南华大学 委员 1： 王宗保，教授，硕导，南华大学 委员 2： 王芳宇，教授，硕导，衡阳师范学院 委员 3： 唐小卿，教授，硕导，南华大学 委员 4： 彭翠英，教授，硕导，南华大学 答辩日期： 2015 年 5 月 24 日 南华大学学位论文原创性声明 本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学 位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文 中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 作者签名： 年 月 日 南华大学学位论文版权使用授权书 本学位论文是本人在南华大学攻读（博/硕）士学位期间在导师指导下完成 的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它 单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校 有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部 或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或 湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位 论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定 享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学 位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论 文，解密后适用该授权。 作者签名： 年 月 日 导师签名： 年 月 日 硫化氢对铀致大鼠肝肾毒性的保护作用 摘要： 研究背景与目的：铀是一种严重的环境风险因子，具有化学及放 射性毒性。肝脏和肾脏是铀的主要靶器官。目前发现，氧化应激是铀 毒性的重要机制之一，使用抗氧化剂或许能清除铀在体内诱导产生的 自由基，具有一定的保护肝肾功能的作用。硫化氢（H2S）被认为是 继 NO 和 CO 之后的第三类气体信号分子，研究证实 H2S 具有抗氧化 应激、抗炎症反应，细胞及器官保护作用等多种生物学效应。在许多 肝肾疾病的病理生理过程中，H2S 也起着关键作用。本课题试图研究 急性铀暴露对大鼠肝脏与肾脏组织的内源性 H2S 的变化情况，探索铀 诱导大鼠的肝肾毒性的分子机制，通过给予外源性 H2S 对铀中毒大鼠 的肝肾毒性进行保护作用，从而阐明 H2S 在铀致大鼠肝肾毒性的保护 作用及其分子机制，为防治铀中毒提供新的视角与理论基础。 方法：在第一章中，建立大鼠急性铀暴露模型，分别按 2.5, 5, 10mg/kg 乙酸双氧铀溶液对大鼠进行单次腹腔注射，暴露 48 h 后处死 大鼠。取样，测定肝肾功能指标、氧化应激指标、组织铀含量，HE 染色法进行肝肾组织结构的观察，采用亚甲蓝分光光度法，测定血清 与肝肾组织内源性 H2S 含量的改变，应用 Western blotting 法，研究 肝肾组织中 H2S 生成酶（CBS 和 CSE）以及 Nrf2 蛋白表达的情况。 在第二章中，用 5 mg/kg 乙酸双氧铀溶液单次腹腔注射大鼠，30 min 后，再给予腹腔注射 NaHS（H2S 供体，28umol/kg 和 56umol/kg）, 第 2 天同一时间再注射 NaHS 一次，48 h 后处死大鼠。取样，测定肝肾 功能指标、氧化应激指标，HE 染色法进行肝肾组织结构的观察，应 用 Western blotting，测定 Nrf2 及其下游蛋白 HO-l、NQO-1、GCLC、 TXNRD-1 的表达，测定 Nf-κB 及其下游蛋白 TNF-α、iNOS、COX-2 I 的表达。在第三章中，铀染毒及 NaHS 给药的时间、方法、步骤和第 二章相同，处死大鼠并取出肝脏组织。测定肝肾功能指标、氧化应激 指标，HE 染色法进行肝肾组织结构的观察。 结果：在第一章中，急性铀暴露引起大鼠肝肾组织铀含量显著性 增加，肝肾功能损伤，组织病理损伤严重，且随着铀暴露剂量的增高 损伤逐渐加重；铀染毒引起肝肾组织氧化应激，导致抗氧化能力下降、 脂质过氧化程度升高；铀染毒诱导大鼠血清和肝肾脏中 H2S 水平降 低，肝肾脏中 CBS 和 CSE 的蛋白表达水平下降；中、高浓度铀染毒 降低了肝肾组织中 Nrf2 的蛋白表达及核转移。在第二章中，外源性 NaHS 处理对急性铀中毒（5mg/kg）具有明显的解毒作用，血清 BUN 及 Cr 含量显著降低，UA