分子生物学课件第八章.pptVIP

真核生物的基因结构与转录活性 真核基因转录机器的主要组成 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 蛋白质乙酰化对蛋白表达的影响 激素与热激蛋白对基因表达的影响 其它水平上的表达调控 ●在某些分泌细胞中，需要几个小时，激活的PKA 进入细胞核，将CRE结合蛋白磷酸化，调节相关基因的表达。许多转录因子都可以通过cAMP介导的蛋白质磷酸化过程而被激活，因为这类基因的5’端大都拥有一个或数个cAMP应答元件（CRE）。 CRE（cAMP response element， cAMP应答元件）是DNA上的调节区域。 (TGACGTCA) 真核生物的基因结构与转录活性 真核基因转录机器的主要组成 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 蛋白质乙酰化对蛋白表达的影响 激素与热激蛋白对基因表达的影响 其它水平上的表达调控 8.6 其他水平上的表达调控 8.6.1 RNA的加工成熟 rRNA化学修饰：甲基化 原核生物：碱基甲基化 真核生物：核糖甲基化 3、真核生物基因转录后加工的多样性 真核生物的基因可以按其转录方式分为两大类：即简单转录单位和复杂转录单位。 ①利用多个5’端转录起始位点或剪接位点产生不同的蛋白质。 反式作用因子上的几种重要的DNA结合结构域有: 依赖cAMP的蛋白激酶是: A.PKC　　 B.PLC　　 C.CKⅡ　　 D.PKG 　 E.PKA 真核生物DNA中胞嘧啶存在甲基化修饰，绝大多数甲基化发生（ ）二核苷酸对上 A、 CC B、 CT C 、CG D、 CA 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。 （ ） 保守性极高DNA结合区，位于C端的激素结合区和保守性较低的N端。 图示 不同激素受体的DNA结合区 类固醇激素通过胞内受体调节生理过程 靶细胞中含有大量激素受体蛋白，而非靶细胞中没有或很少有这类受体。研究表明，激素，受体，顺式作用元件的结合位点三者缺一不可。 2. 热激蛋白诱导的基因表达 能与某个（类）专一蛋白因子结合，从而控制基因特异表达的DNA上游序列称为应答元件。应答元件主要有： 热激应答元件（HSE） 糖皮质应答元件（GRE） 金属应答元件（MRE） 应答元件与细胞内专一的转录因子相互作用，协调相关基因的转录。 调控因子 应答元件 DNA序列 结合蛋白 热激 HSE CNNGAANNTCCNNG HSF 镉 MRE CGNCCCGGNCNC ？ 佛波酯 TRE TGACTCA AP1 血清 SRE CCATATTAGG SRF 2. 热激蛋白诱导的基因表达 许多生物在最适温度范围以上，能受热诱导合成一系列热休克蛋白（heat shock protein，HSP），又称热激蛋白。 受热后，果蝇细胞内Hsp70 mRNA水平提高1 000倍，就是因为热激因子（heat shock factor，HSF）与hsp70基因TATA区上游60bp处的HSE（热激应答元件）相结合，诱发转录起始。 不受热或其他环境胁迫时，HSF（热激因子）主要以单体的形式存在于细胞质和核内。单体HSF没有DNA结合能力。 受热激或其他环境胁迫时，细胞内变性蛋白增多，与HSF竞争结合Hsp70，从而释放HSF，使之形成三体并输入核内。HSF的三体能与HSE（热激应答元件）特异结合，促进基因转录。 HSF的这种能力可能还受磷酸化水平的影响。热激后，HSF不但形成三体，还会迅速被磷酸化。HSF与HSE的特异性结合，引起包括Hsp70在内的许多热激应答基因表达，大量产生Hsp70蛋白。随着热激温度消失，细胞内出现大量游离Hsp70蛋白，它们与HSF相结合，形成没有DNA结合能力的单体并脱离DNA。 Contents 真核生物的基因结构与转录活性 真核基因转录机器的主要组成 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 蛋白质乙酰化对蛋白表达的影响 激素与热激蛋白对基因表达的影响 其它水平上的表达调控 1、rRNA和tRNA的加工成熟 rRNA加工有两个内容，一个是分子内的切割，另一个是化学修饰。 真核生物的rRNA基因转录时先产生一个45S的前体rRNA，然后前体rRNA很快就会被加工降解，生成不同相对分子质量的成熟rRNA。 tRNA基因转录时也可能先生成前体tRNA，然后再进行加工成熟。一般认为，tRNA基因的初级转录产物在进入细胞质后，首先经过核苷的修饰，生成4.5S前体tRNA，再行剪接成为成熟tRNA（4S）。 编码蛋白质的基因转录产生mRNA。这类基因产物在转录后要进行一系列的加工变化，才能成为成熟的有生物功能的mRNA。 编码蛋白质的基因转录时首先生成前体pre-mRNA(或称核不均一RNA，hnRNA)，然后再加工剪接为成熟mRNA。 这些加工主要包括在