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无动物源性水牛精液冷冻保存稀释液的研究
5.2本研究的不足之处…………………………………………………………一31
5.3下一步值得研究的工作………………………………………………………3l
参考文献………………………………………………………………………………32
附录…………………………………………………………………………………37
致谢…………………………………………………………………………………………………………一39
Ill
无动物源性水牛精液冷冻保存稀释液的研究
摘要
水牛精液冷冻保存主要用含卵黄的稀释液,但其冷冻保存效果不如黄牛,以致
水牛种公牛的利用率远低于黄牛。因此,开发水牛精液冷冻保存稀释液配方,进一
步提高精液冷冻保存效果,对于提高优秀种公牛利用率,加速水牛品种改良,具有
非常重要的意义。此外,含动物源(卵黄、奶粉等)的精液冷冻保存液虽有较好的
保护效果,但易传播疾病,在国际贸易中逐渐被淘汰。为了提高卵黄稀释液的冷冻
保存效果,以及开发不含动物源物质的水牛冷冻精液新型稀释液,本研究以4头槟
榔江水牛精液为试验对象,以现有卵黄稀释液作为对照,设计新的稀释液配方,通
过评定冻后精子活率、畸形率以及运动性能:包括曲线运动速度(vCL)、直线运动
探讨以卵黄稀释液为基础,添加不同浓度褪黑素或新抗生素(GTLS),以及用大豆
卵磷脂替换卵黄,联合褪黑素和GTLS的冷冻保护效果,筛选出适合水牛的精液冷
一、改进卵黄稀释液配方
1、卵黄稀释液中添加褪黑素的精液冷冻保存效果:在卵黄稀释液中分别添加低
(10j
mol/L)、中(10’4moFL)、高(10。3moYL)浓度的褪黑素后,发现添加低浓度
及畸形率有所改善,但褪黑素浓度过高时,精液的冷冻效果反而降低。低浓度组的
比对照(43.17%)有所下降(尸0.05)。因此,中浓度组试验效果最好,
2、卵黄稀释液中用新抗生素组合(GⅡ,s)替换青链霉素(sP)的精液冷冻保存效果:
1)
发现精液冻后质量随着抗生素浓度的增加而提高,但过高浓度的抗生素则会影响到冷冻效
华中农业大学2014届硕士研究生学位(毕业)论文
降,随着浓度的刚氐而增加。故卵黄稀释液中添加中浓度的抗生素组合冷冻效果最好。
二、无动物源性稀释液配方研究
l、用大豆卵磷脂替换卵黄的精液冷冻保存效果:用3%、4%和5%的大豆卵磷
替换稀释液中的卵黄成分,以浓度3%的冷冻效果最好。
2、大豆卵磷脂和新抗生素组合GTLS的联合应用效果:将浓度分别为3%、4%、5%的
卵磷脂和抗生素浓度的增加,冻后精子的运动性能和活率呈下降趋势,畸形率呈上升趋势。
3、大豆卵磷脂和褪黑素的联合应用效果:将浓度分别为3%、4%、5%的大豆
卵磷脂和浓度分别为低(10一tool/L)、中(t04
素联合应用,发现:大豆卵磷脂和褪黑素的浓度与冻后精子的运动性能和活率成反
(PO.05)。说明大豆卵磷脂与褪黑素联合应用的冷冻保护效果不佳。
关键词:槟榔江水牛;精液冷冻;大豆卵磷脂;褪黑素;新抗生素
无动物源性水牛精液冷冻保存稀释液的研究
Abstract
We use extenderto buffalo the
alwaysegg-yolk cryopreservesemen,butprotect
effectoffrozensemencouldbeworseandtheuseratioofbuffalofarlessthancattle.So
it is thatweresearchand theformulaof
greatsignificant develop
extenderofbuffalosemen.Theeffectof canbe
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