第五章体内药物分析模板.pptVIP

（三）、辍合物的水解： 酸水解法：强酸、加热 酶解：常用葡萄糖醛酸酶，一般控制pH4.5~5.5 ，37℃孵育数小时。 溶剂解： * 感谢你的观看 2109年5月18日 （四）、化学衍生化 1、使药物变成能被分析的性质 2、提高检测灵敏度 3、增强药物稳定性 4、提高对光学异构体分离的能力 气相色谱衍生化 液相色谱衍生化 * 感谢你的观看 2109年5月18日 衍生化方法：柱前衍生， 柱后衍生 气相色谱衍生化方法：硅烷化、酰化、烷基化、不对称衍生化 液相色谱衍生化方法：紫外衍生化、荧光衍生化、电化学衍生化、手性衍生化 * 感谢你的观看 2109年5月18日 第三节、体内样品分析方法与方法验证 一、分析方法的建立 （一）、分析方法的选择 1、色谱分析法 2、免疫分析法 3、生物学方法 * 感谢你的观看 2109年5月18日 常用分析方法的特点 分析方法 检测限度/10-8g/ml 特异性/分离能力 紫外分光光度法（UV） 100 － 荧光分光光度法（Fluor） 0.1 + 原子吸收光度法（AA） 0.1 + ? ? 气相色谱法（GC） ? ? 氢火焰离子化检测器（FID） 1～10 ++ 氮磷检测器（N-PD） 0.1～0.01 +++ 电子捕获检测器（ECD） 0.01 +++ 质谱检测（MS） 0.001 ++++ 高效液相色谱法（HPLC） ? ? 紫外检测器（UV） 10 ++ 荧光检测器（Fluor） 0.1 +++ 电化学检测器（ECD） 0.01～0.001 +++ 质谱检测 ? ?++++ 免疫法（RIA） 酶免疫法（EIA） 0.001 ++ 0.001 ++ 放射免疫 0.001 * 感谢你的观看 2109年5月18日 （二）、分析方法建立的一般程序 1、色谱条件的筛选：确定最佳分析检测条件；色谱柱(型号、牌号、填料性质、柱长度)；流动相组分及配比、流速、柱温、进样量、内标物质的浓度及其加入量等；使各物质具有足够的方法灵敏度(LOQ)；良好的色谱参数(n、R、T)和适当的保留时间(tR)。 * 感谢你的观看 2109年5月18日 2、色谱条件的优化： 在进行分离条件筛选时，应考察生物基质中的内源性物质及代谢产物对分离与检测的干扰，步骤如下： 空白溶剂试验 ——溶剂(方法特异性) 空白生物基质试验 —— 内源性物质干扰(方法特异性) 模拟生物样品试验 —— 方法验证（效能指标） 3、实际生物样品测试 * 感谢你的观看 2109年5月18日 二、分析方法的验证 1．特异性——避免干扰 2．标准曲线与线性范围 3．定量限——灵敏度 4．精密度与准确度——结果可重现 5．样品稳定性 6．提取回收率 7．分析过程的质量控制 准确度 精密度 专属性 检测限 定量限 线性 范围 耐用性 体外药物分析 * 感谢你的观看 2109年5月18日 样品制备：去除蛋白质、缀合物水解、化学衍生化、分离浓集（液液萃取、固相萃取等）； 样品测定：光谱分析法、色谱分析法、免疫分析法、生物学方法 方法验证：特异性、标准曲线和定量范围、定量下限、精密度与准确度、稳定性、提取回收率 体内药物分析： * 感谢你的观看 2109年5月18日 第一节、常用体内样品的制备与贮藏 一、体内样品的种类、采集与制备 （一）血样：血浆、血清 血浆：选用最多。因血浆中的药浓可反映药物在体内的状况。而且血浆中药物浓度的数据报道较多，可供借鉴。血浆是全血在加肝素、枸橼酸、草酸盐等抗凝剂的全血经离心后分取，量约为全血的一半。 * 感谢你的观看 2109年5月18日 血浆的制备：采集的静脉血液置含有抗凝剂的试管中，混合后，以2500?3000r/min离心5?10min使与血球分离，所得淡黄色上清液即为血浆。 抗凝剂—最常用的是肝素（heparin），肝素是体内正常成分，因此不会改变血样的化学组成或引起药物的变化，一般不会干扰药物的测定。通常1ml血液需用肝素0.1?0.2mg或20IU(1mg?126IU)。可不必准确控制 其它抗凝剂EDTA、枸橼酸盐、草酸盐等，是与血液中的钙离子结合的试剂，它们可能引起被测组分发生变化或干扰某些药物的测定，不常使用。 * 感谢你的观看 2109年5月18日 血清的制备：采集的静脉血液置试管中，于37℃或室温放置30min?1h。血液凝固后，用细竹棒或玻璃棒轻轻剥去试管壁上的血饼，再在2500?3000 r/min离心5?10min，上层淡黄色液体即为血清。