课件：肿瘤靶向性药物个体化治疗李智.ppt

基因 突变位点 突变功能 用药建议 EGFR Del（Glu746--Ala750） 高反应性 建议用此类药化疗 Leu858Arg 高反应性 建议用此类药化疗 酪氨酸激酶抑制剂(EDFR TKI) :吉非替尼,埃罗替尼 主要用于非小细胞肺癌。绝大多数非小细胞肺癌病人对吉非替尼无反应，但约10~15% 的病人对吉非替尼表现出快速，且非常显著的临床疗效。 EGFR基因18-21号外显子编码酪氨酸激酶区，此段基因序列发生突变后会使EGFR被配体激活后磷酸化程度升高或持续激活下游信号通路，从而使TKI抑制剂吉非替尼的疗效更好。 EGFR突变与吉非替尼、埃罗替尼疗效 EGFR突变与吉非替尼疗效 突变者1年和18个月存活率者为90%和80%，而野生型分别为60%和40% 0 6 12 18 24 30 38 0 25 50 75 100 Proportion alive Log-rank p=0.01 EGFR exon 19 deletion (n=23) EGFR L858R (n=11) Months 19号外显子的缺失突变平均存活时间为34个月，大大长于21号外显子突变者的8个月，后者的存活时间也比野生型长。 EGFR突变与吉非替尼、埃罗替尼疗效 石蜡包埋标本切片 刮取切片或直接溶解 （放在EP管里的标本） 选取至少含50%肿瘤 组织的切片 试剂盒提取DNA DNA了浓度检测（质控） 目的基因特异引物PCR 扩增 PCR产物纯化后上机Sanger法测序 结果分析与发报告 EGFR 突变检测流程 EGFR 突变检测标本送样要求 石蜡包埋组织标本要求同前 外周静脉非肝素抗凝血液 ---大量研究表明外周血DNA与肿瘤组织标本DNA的EGFR基 因型的吻合率为76%~91%（ Jon et al. J Clin Oncology 26(35),2008 ---适用于：NSCLC晚期患者不能手术治疗者 用药建议 EGFR基因19-21号外显子突变的 纯合子或杂合子病人，建议使用含吉非替尼、艾罗替尼的化疗方案可以取得较好疗效，显著延长期生存期；无突变者不推荐使用酪氨酸激酶抑制剂。 EGFR 突变检测报告 肿瘤靶向性药物个体化治疗 三、胃肠间质瘤与c-Kit基因突变检测 胃肠间质瘤 （gastrointestinal stromal tumors, GIST） 胃肠道最常见的肉瘤： --间叶源（结缔组织）性肿瘤 --占胃肠道肉瘤的80% GIST年发病率为14.5/100万，患病率为129/100万。 1993年发现CD34为免疫组化标记物，1998年发现CD117为高特性标记物，并发现c-Kit基因突变。 GIST的免疫表型 GIST中KIT的阳性染色（膜和胞浆以及核旁点状浓集） 约95%的GIST c-Kit (CD117)阳性。 GIST中其它阳性指标： --CD34(间叶/造血祖细胞标记物），阳性率60-70%。 --平滑肌动蛋白，阳性率15-60%。 -- S-100，阳性率10%。 GIST偶尔表达结蛋白。 c-Kit受体 家族功能获得性c-Kit突变导致GIST、黑色素细胞功能障碍和皮肤肥大细胞增多症的发病率增高 c-Kit受体：CD117、干细胞因子受体(SCFR)、肥大细胞生长因子受体(MGFR） 受体结构： 位于细胞膜上，为Ⅲ型酪氨酸激酶受体。细胞外有与配体干细胞因子（SCF）结合区域。细胞胞内区包括： 2个酪氨酸激酶区和多个自身磷酸化位点。 生理活性：KIT受体与干细胞因子结合后被激活（磷酸化），导致磷酸化级联反应，能够调节凋亡、细胞分化、增殖、趋化以及细胞黏附。 GIST治疗现状 手术切除可能治愈，但复发转移率高（55%-90%） 放射治疗不敏感，RR5%。 传统全身化疗：无效或10%，未延长OS。 支持疗法不能控制病情进展。 目前内科药物治疗主要采用靶向性药物: --伊马替尼（Imatinib,格列卫），为复发、 转移GIST的标准一线治疗药物 --舒尼替尼 伊马替尼作用机制 伊马替尼作用于c-Kit蛋白，与c-Kit蛋白结合，占据了ATP在激酶区的结合位点。 阻止底物的磷酸化及信号传导。 信号传导阻滞，抑制了细胞的增殖与存活。 可作用于多靶点: --除c-Kit外，还有c-Ab1、Bcr-Ab1和PDGFR。 KIT基因突变 Heinrich et al. Hum Pathol 2002;33:484. 细胞膜 细胞浆 Exon 9: 18.1% Exon 11: 66.9% Exon 13: 1.6% Exon 17: 1.6% Juxta