课件：化疗联合靶向治疗.pptVIP

实验方法 — 主要试剂配制 逐次稀释苹果酸舒尼替尼、奥沙利铂，使之成系列浓度。 实验方法 — MTT法检测细胞增殖情况 单药处理： 培养细胞 铺板 加化疗药 加DMSO 弃液 加MTT 震荡 酶标仪测值 数据处理 实验方法 — MTT法检测细胞增殖情况 双药处理： 培养细胞 铺板 加抑制剂 加DMSO 加MTT 加化疗药 震荡 酶标仪测值 数据处理 实验方法 — Hoechst法证实细胞凋亡存在 ·正常细胞对染料拒染，荧光着色淡 ·凋亡细胞主要摄取Hoechst染料呈强蓝色荧光 ·处于亚二倍体区的细胞群属于形成凋亡小体的 细胞 实验方法 — Hoechst法证实细胞凋亡存在 培养细胞 药物干预 单细胞悬液 染 色 洗 涤 固 定 洗 涤 铺 片 检 测 实验方法 — AnnexinV－PI法检测凋亡 培养细胞 药物干预 单细胞悬液 孵育 加试剂 分装 流式细胞仪分析 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 实验结果 — 不同时间抑制率比较 图2 药物Sunitinib在不同时间对Lovo细胞的抑制（%） 变异来源 自由度 SS MS F P 处理组间变异 2 1431.1819 715.5910 14.28 0.0012 区组间变异 5 931.8561 346.3721 5.92 0.0301 误差 10 500.9809 50.0981 总变异 17 2664.0189 注：方差齐性检验P= 0.1904 经分析结果显示, 处理组间变异F=14.28，P=0.0012，可以认为不同用药时间抑制率值的差异具有统计学意义；三组之间的两两比较采用SNK-q检验，三组间差异均具有统计学意义；区组间变异F=5.92，P=0.0301，可以认为不同用药浓度抑制率值的差异具有统计学意义。 Sunitinib作用于Lovo细胞表现出明显的时间、浓度依赖性 实验结果 — 不同时间抑制率比较 图3 药物奥沙利铂在不同时间对Lovo细胞的抑制（%） 变异来源 自由度 SS MS F P 处理组间变异 2 2.6047 1.3037 8.34 0.0913 区组间变异 5 3884.7101 776.9420 4653.40 0.0001 误差 10 1.669621 0.166962 总变异 17 3888.9871 注：方差齐性检验P= 0.1904 经分析结果显示, 处理组间变异F=8.34，P=0.0913，尚不能认为不同用药时间抑制率值的差异具有统计学意义；区组间变异F=4653.40，P0.0001，可以认为不同用药浓度抑制率值的差异具有统计学意义。 奥沙利铂的时间依赖性效应相对不明显，存在浓度依赖性 实验结果 — 不同时间抑制率比较 注： A奥沙利铂 B Sunitinib 图4 不同方案在各测量时间对Lovo细胞的抑制（%） 变异来源 自由度 SS MS F P 处理组间变异 4 2628.4726 657.1128 35.07 0.0001 区组间变异 5 3064.5971 612.9194 32.71 0.0001 误差 20 374.7888 18.7394 总变异 29 6067.8585 注：方差齐性检验P= 0.1904 经分析结果显示, 处理组间变异F=35.07，P0.0001，可以认为不同给药方案抑制率值的差异具有统计学意义；五组之间的两两比较采用SNK-q检验，五组间差异均具有统计学意义；区组间变异F=32.71，P0.0001，可以认为不同用药浓度抑制率值的差异具有统计学意义。 实验结果 — 细胞周期 肠癌Lovo 细胞经奥沙利铂作用24h再经Sunitinib作用72h后，G0/ G1 期细胞由61.18%±2.27%下降到6.58%±2.16%,S 期细胞由29.35%±1.23%下降到28.47%±1.83%,而G2/ M 期细胞由11.