来源于脐血与骨髓中间充质干细胞和造血干细胞的比较-生物化学及分子生物学专业论文.docxVIP

天津医科人学坝}‘{lJ『究生论文英文缩略语词汇 天津医科人学坝}‘{lJ『究生论文 英文缩略语词汇 英文缩略语 英文名称 中文名称 ALP alkaline phosphatase 碱性磷酸酶 BM bone marrow 骨髓 CFU．F colony forming units fibroblasts 成纤维细胞集落形成单位 Col I type I collagen I型胶原 DEX dexamethasone 地塞米松 FBS fetal bovine serllm 胎牛血清 HSC hematopoietic stem cell 造血干细胞 MACS magnetic cell sorting 免疫磁珠分离系统 MNC mononuclear eell 单个核细胞 MSC mesenchymal stem cell 间充质干细胞 OCN osteocalcin 骨钙素 PBS phosphate buffer solution 磷酸盐缓冲液 SCF stem cell factor 干细胞因子 TPO thrombopoietin 促血小板生长素 UCB umbilical COrd blood 脐血 B—GP B-glycerophosphate 13．甘油磷酸 天津藩辩太学坝I颀究生论文摘 天津藩辩太学坝I颀究生论文 摘 要 目的： 残察毒睾=终分离培养麴臃照与镬’髓中闽充质干鳃腿稳造盘干缎嚣篷扩躞及囱 成骨细胞诱导的特性，探讨脐_曲与骨髓干细胞的差异和造血干细胞向成骨细 瞧豹分纯。 方法： 掰密度梯废离心法体井分离、缝化和培养簖血与管髓中单个核细胞 (MNC)和CD34+细胞，加入SCF和TPO促膦血CD34+细胞扩增。在细胞 甄占壁后，加入地塞米松、0．甘油磷酸和抗坏血黢，向成骨细胞邂向诱导。用 瑞氏染偬、碱性磷酸酶(ALP)染色、嚣钙素和l型胶原免疫缀化染镪、矿 化结节染色和流式细胞仪分型作为检测手段，观察脐胤与骨雠中MNC和 CD34+-N腿戆形态、生长特性、诱导分{皂露表甏标恚数不同。 结果： l、分离{8傍耪盘，只有12蹬获褥了精鼙蹋麓。MNC俸辨培养可以获 褥贴壁细胞，但形态不均一，主要为破骨样细胞和纤维样细胞，传代不超过 二次。痢成骨细胞诱导后细胞形态交纯不大，ALP增多，骨钙索和I黧胶原 染色阳性，矿化结节染色显示无钙沉积。脐血CD34+细胞经SCF和TPO刺 激，扩增潜能较高，体外扩增稻可以获得少量贴壁细胞，传代厢不再贴壁生 长。 2、分离12份骨髓，均获得了贴壁细胞。MNC和CD34+细胞体外培养 胃越获褥影态筠一匏绎缍样嚣苦壤缨憝，是阉充藤干绥藏(MSC)，无需添糖细 胞因子即可扩增，可多次传代。贴壁细胞向成糟细胞诱导后细胞变大，ALP 明显增多，分泌骨钙索和I垄胶原，有钙沉积。 结论： 1、骨髓CD34+细胞低表达Stro．1，其中含有成骨细胞的前体细胞；脐血 一。 一。 墨望篓篓垒篓矍!：篓!!釜釜塞一．——— CD34+绷脆高袭这Stro一1，在体卦只能钱获褥稀少的贻蹙镝魏，捷示雷髓造 盎鳃藏与膝盎遣盘缨赡(CD34+缀鼹)敬蛙爨不鼹。 2、麟盘中怒孬禽鸯翘杰凌榉干绥憋仍然楚 个骞挚议弱闽怒，我稍粒实 渣维爨爨示，薪矗不辘获得葵蘩鹣阊竞矮棰予蠲艇。 3、脐血MNC体外培养后数得贴麟细胞，缀然从形态上魈破骨细胞样， 餐疯袋鸯潺雾爨露激装运褒雷缨熬臻；悫奄，蠡ALP、Cot{窝OCN，舞示遴 蝗细胞猩功能上至少融缝具备了巢魑成露细胞的性质。 关键词l脐血：骨熬；遣血于绷胞；CD34+细艨；间巍质于绑趟 灭律氍科夫学蕊l“磷究生论文Abstract 灭律氍科夫学蕊l“磷究生论文 Abstract Objective： To observe the characteristics of the mesenchymal stern cells(MSC)and hematopoietic stem cells(HSC)isolated from umbilical cord blood(UCB)and bone marrow(BM)in vitro，explore their difference and the differentiation of hemetopoietic stem cells to osteoblast． Methods： Mononuclear cells(MNC)and CD34+selected cells were isolated，purified from umbilical cord blood and bone malTow by density gradient centrifugation and cultured in vitro，SCF an