沙棘组培快繁体系的建立及组培苗生根的生理生化机制研究-植物学专业论文.docxVIP

沈阳农业大学硕士学位论文摘 沈阳农业大学硕士学位论文 摘 要 本试验以“实优1号”大果沙棘品种为试材，研究沙棘组织培养的最 佳培养条件，以建立完整的沙棘离体快繁体系，并探讨不定根形成的生理 生化机制，为提高沙棘组培苗生根率提供科学依据，为不定根形成的理论 研究积累资料。 在沙棘组织培养试验中，以带休眠芽的茎段为外植体，采用Bs基本培 养基附加不同种类和浓度的激素，在光强2000Lx，温度25±10c的条件下 进行培养。结果表明，在启动培养时，以Bs为基本培养基，附加6-BA0．5mg／L 配合NAA0．5～1．0mg／L，蔗糖浓度为3％，诱导效果最好，接种一周后就可 见休眠芽萌发，四周左右休眠芽可长至2～4cm长；沙棘的继代增殖培养， 要适当降低基本培养基的浓度，选用I／285培养基效果比较好，激素浓度为 6-BA0．5mg／L，NAA0．5mg／L，可培养出大量具有分化能力的丛生芽，在相 同的培养基上可以进行扩繁培养，切割成带一个节的茎段扩繁系数镀高， 为6．7：沙棘组培苗在适宜的条件下可以诱导生根，一般以1／2 B5为基本培 养基，附加IBAl．0mg／L和6-BA0．1mg／L，蔗糖浓度为2％，琼脂O．55％， DH5．8，约15天可见生根，30天时生根率达85％：研究试管苗移栽条件， 结果表明，先以洗净的河沙为基质利于沙棘试管苗高质量根系的发展，根 系足够发达之后移栽到珍珠岩与腐殖土混合的基质中，成活率可达50％。 利用所培养的沙棘组培苗，在附加1．Ome,mmA和O．1mg／L6一BA的 1／2Bs培养基和无激素的1／285培养基上建立起沙棘组培苗生根试验系统， 对植株不定根形成过程中的生理生化指标变化进行较全面的研究，结果表 明： 1．不定根形成过程中，适当激素处理可诱导外植体可溶性蛋白含量的 增加，促进淀粉的分解，增加可溶性糖的含量，以满足不定根形态发生所 摘 摘 要 需要的物质和能量。 2．激素处理可以诱导外植体PPO、POD活性在生根时期呈现不同的变 化。在不定根形成的不同阶段，酶活性差异显著，PPO的活性比较高，呈 现先j二升后下降，然后再上升的趋势，POD也是上升，_F降，再上升的变 化，但其活性较低。表明植物生长调节物质可以通过调节体内氧化酶活性 来促进不定根的形成。 3．在外源激素的作用下，四种植物内源激素都发生相应的变化。内源 IAA在不定根原基形成时期有一含量高峰，之后又恢复到原初水平；赤霉 素和脱落酸的含量在根原基形成时期有所减少；内源ZR的含量在根原基形 成以前降低，根原基形成后，细胞分裂期升高。 关键词：沙棘：组织培养：生根：生理生化指标；内源激素 沈阳农业大学硕士学位论文刖 沈阳农业大学硕士学位论文 刖 舌 沙棘是胡颓子科沙棘属植物，属于落叶灌木或乔木。沙棘的生态适应 性广、截流蓄水能力强、水分利用经济、培肥固定土壤、容易成活、能与 多种植物共栖互利等，是防风固沙的优秀先锋树种。沙棘的果实和叶子中 还富含多种生物活性物质，目前已发现的生化活性成分达190多种，有多 方面的医疗保健功能，其对心血管、呼吸、消化系统等疾病的独特疗效近 年来多有临床报道，具有很高的经济价值。由于沙棘这些众多的优良特性， 近几年来，其在食品、饮料、化妆品、医药、生态保护等领域得到广泛的 利用。 随着我国沙棘产业的深入发展，对良种苗木的需求不断增加。我国虽 然沙棘资源丰富，但普遍存在果小、刺多、难采摘等弱点。目前生产上推 广的沙棘品种主要是从俄罗斯引进的和我国自已培育的大果沙棘。 沙棘是雌雄异株植物，在自然条件下主要靠种子繁殖，这样在生产上 就难以保持优良品种的特性。沙棘还可以进行根孽繁殖，但繁殖系数较低。 目前生产上采用的扦插繁殖成活率也不高，还容易传播病害。而利用组织 培养方法工厂化大规模繁育种苗能成百倍千倍地提高繁殖系数，还可以生 产无病植株。此外，利用组织培养方法还可以建立离体无性种质资源库， 可替代占用大量土地面积的资源圃，这将对我国沙棘育种，资源更新等起 到巨大的推动作用。 目前，对沙棘组织培养的研究也多有报道，然而，不同研究者的繁殖 效率却差异较大，快繁体系也不健全，尚未达到生产水平。而且，关于沙 棘组织培养方面的研究报道大多数都限于研究培养的条件、培养过程中的 细胞和形态学观察，缺少对组织培养过程中生理生化变化的研究，在同一 研究中采用多指标的系统研究更少。使我们还不能清晰的了解在组织培养 前 前 言 过程中细胞和组织形态学变化与生理生化变化的关系，即还不能揭示组织 培养过程中的形态变化的内在基础。 本试验以“实优1号”大果沙棘品种为材料，研究了以外植体的诱导、 丛生苗生成、扩繁、生根、试管苗的炼苗、移栽等整个沙棘组织培养流程 的各个技术环节，建立一套完整的沙棘离体快繁体系，为提高沙棘的繁殖 系