昆虫激肽伪脯氨酸类似物的合成及其构效关系的相关研究-生物学、多肽药物生理学专业论文.docxVIP

◎燃爹 ◎燃爹 绑麟硕士研究生学位论文 4 兰州大学研究生学位论文电子版使用授权书 《昆虫激肽伪脯氨酸类似物的合成及其构效关系的相关研究》是本人在兰州 大学攻读博士[3／硕士团学位的毕业论文，现已通过答辩。本人作为此论文的著 作权人，同意向兰州大学图书馆提交该论文的电子版和印刷本各一份。 根据《中华人民共和国著作权法》的规定，本人授权兰州大学图书馆对该论 文电子版享有以下权力：(同意者画4) l、同意提交全文。可以在提交 半年(公开)口 一年(秘密) 团 二年(机密)口 三年(绝密)口 期限之后，由图书馆在校园网上提供全文浏览。 2、本人论文解密之后，同意向“CALLS高校学位论文全文数据库’’提交： 论文标题、提要和论文前16页 口 论文全文 团 3、不同意提交电子版论文口。 (选此项者，须由作者本人出具不能公开 证明，导师签字，院系所加盖公章。) 图书馆承诺： 1、不对论文从事收集、保存、发布以外的其他活动： 2、未经著作权人同意，不得从事营利性活动。 院系：生命科学学院 学号： 作者(授权人)签名： 时间： 被授权人：兰卅l大学图书馆 ◎ ◎ 抽一 幺幡滴看珊 兰州大学硕士研究生学位论文 5 目 录 摘要 ．1． Abstract ．．2． 1 前言 ．3． 1．1昆虫激肽 ．．．3． 1．2昆虫激肽的生理学作用 ．4． 1．2．1肌肉收缩作用 ．4． 1．2．2调节马氏管的作用 ．5． 1．2．3与其它昆虫利尿肽的协同作用及其利尿机制 ．．6． 1．2．4其它生物学作用 ．6． 1．2 昆虫激肽的构效关系研究 ．．7． 1．3 昆虫激肽家族受体研究 ．．8． 1．4与脊椎动物神经肽家族的比较研究 ．9． 1．5伪脯氨酸及其在多肽研究中的应用 ．．．1O． 2立题依据与实验设计 ．．．13． 3材料与方法 ．．．16． 3．1材料与仪器 ．．．16． 3．1．1试剂与药品 ．．．16． 3．1．2实验动物 ．1 6． 3．1-3仪器设备 ．．．16． 3．2 Fmoc-Phe一、l，Pro-OH的化学合成 ．．17． 3．2．1合成线路的设计 ．17． 3．2．2合成说明 ．17． 3．2．3二肽Fmoc．Phe-Ser(№№Pro)．OH的合成步骤 ．．1 8． 3．2．4二肽Fmoc-Phe．Cys(H月Pro)．OH和Fmoc．Phe．Cys(M。’№Pro)．OH的合成．．19． 3．3多肽的合成与纯化 ．22． 3．3．1多肽合成 ．22． 3．3．2多肽切割 ．24． 3．3．3多肽纯化 ．25． 3．4蟑螂离体后肠收缩活性实验 ．．．25． 3．4．1昆虫生理液配制 ．25． 3．4．2后肠收缩活性测试 ．25． 3．5实验结果统计分析 ．．．26． 4 结果 ．．．27． 4．1化学中间体及肽合成结果 ．．．27． 4．2后肠收缩实验结果 ．27． 5讨论与结论 ．30． 参考文献 ．33． 致 谢 ．．．38． ◎燃鎏纠大学硕士研究生学位论文 ◎燃鎏纠大学硕士研究生学位论文 -l- 摘 要 【目的】本课题旨在通过引入可诱导cis／trans异构变化的伪脯氨酸QFPro)，构 建高c括构象含量的昆虫激肽类似物，并用蟑螂后肠收缩活性检测来阐明C端五 肽H．Phe-Xaa-Yaa-Trp-Gly-NH2的优势活性构象。Pseudoprolines(甲Pro)是由 Ser／Thr和Cys与醛或酮环化缩合而成的Pro类似物，其脯氨酰环中的C，H2基被 氧或硫原子取代。将、：FPro引入多肽中能够提高Xaa．Pro肽键中的c／s构象的比率。 【方法】本文描述了由Ser和Cys经过甲醛和2，2．二甲氧基丙烷经缩合环化反应 形成伪脯氨酸Ser(Me—Pro)．OH、Cys(nH Pro)．OH和Cys(M。，M。Pro)．OH的过程， 同时还描述了昆虫激肽H．Phei．Phe2．Pr03-Trp．Gly5-NH2及其、FPr03代类似物通过 Fmoc固相合成方法的合成，用ESI．MS和HPLC对昆虫激肽类似物的结构和纯 度进行分析。【结果】通过用不同、：FPro取代的昆虫激肽类似物进行促蟑螂后肠 收缩活性研究，结果表明Pro-kinin、Ser(Me，Me)-kinin、Cys(H，H)．kinin和 Cys(Me，Me)．kinin分别保留了昆虫激肽Achetakinin 1在1．1×10刁M时62％、 93％、68％和88％的最大活性；而与之对应的EC50值分别为2．81×10一M，3．74× lO。8 M，2．12×10罐M和1．79×10一M。【结论】以上实验结果表明，含具有诱 导高顺式构象的双甲基取代的甲Pr0昆虫激肽类似物有更高的活性，有利于形成 Phel-4 c／s．Pro VI型p