- 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
本人声明,所呈交的学位(毕业)论文,是本人在指导教师的指导下独立完
成的研究成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已作 了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果。与我一同对本 研究做出贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意,如被查有侵犯 他人知识产权的行为,由本人承担应有的责任。
学位(毕业)论文作者亲笔签名: 日期:
论文使用授权的说明
本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定,即学 校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅; 学校可以公布论文的全部或 部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。
保密,在 年后解密可适用本授权书。 □ 不保密,本论文属于不保密。 □
学位(毕业)论文作者亲笔签名: 日期:
指导教师亲笔签名: 日期:
i
i
目录
摘 要 I
1 引言1
1.1 南方水稻黑条矮缩病毒的研究进展 1
1.1.1 南方水稻黑条矮缩病的发现、分布以及危害 1
1.1.2 南方水稻黑条矮缩病的表型症状特点 1
1.1.3 南方水稻黑条矮缩病的自然寄主和传播介体 2
1.1.4 SRBSDV 的病毒学分类地位 3
1.1.5 SRBSDV 的基因组结构及其功能研究 4
1.2 植物呼肠孤病毒复制场所—病毒原质的研究进展 6
1.3 植物病毒在介体昆虫体内的侵染循回过程 7
1.4 原核表达系统的研究概况以及应用 8
1.5 RNAi 的发现以及应用 9
RNAi 的发现 9
RNAi 的原理 10
RNAi 技术应用 10
1.6 本研究的目的和意义 11
2 实验材料和方法12
2.1 实验材料12
2.1.1 菌株和载体12
2.1.2 水稻病株和介体昆虫白背飞虱 12
2.1.3 实验试剂12
2.1.4 实验主要器材13
2.2 实验方法13
2.2.1 SRBSDV 蛋白 P5-1 抗体的制备 13
引物的设计和合成13
感染 SRBSDV 的水稻总 RNA 提取 13
RT-PCR 扩增 SRBSDV 的基因片段 P5-1 14
纯化回收扩增的 SRBSDV P5-1 产物 15
入门载体 pDONR221-P5-1 的构建 16
原核表达载体 pDEST17-P5-1 的构建 18
原核表达载体 pDEST17-P5-1 转入 Rosetta(DE3)菌株 18
SRBSDV 非结构蛋白 P5-1 抗血清的制备 19
0 P5-1 抗血清的特异性检测 19
1 P5-1 抗血清的纯化 20
2 抗体交联荧光素21
3 P5-1 在 SRBSDV 侵染的白背飞虱体内的分布 21
2.2.2 源于 SRBSDV 基因片段的 dsRNAs 对病毒侵染白背飞虱的影响 22
dsRNA 的引物设计和合成 22
微针注射体外合成的 dsRNA 23
免疫荧光标记检测 dsRNAs 处理对 SRBSDV 在白背飞虱体内侵染的影 响 23
RT-qPCR 检测体 dsRNAs 处理对 SRBSDV 侵染白背飞虱的影响 23
ii
ii
Western blot 检测 dsRNAs 处理后 SRBSDV 编码的相关蛋白在白背飞虱 体内表达量的变化 23
3. 结果分析24
3.1 SRBSDV 非结构蛋白 P5-1 抗体的制备 24
3.1.1 RT-PCR 扩增目的片段 24
3.1.2 入门载体 pDONR221-P5-1 的构建 25
3.1.3 原核表达载体 pDEST17-P5-1 的构建 26
3.1.4 原核表达载体 pDEST17-P5-1 转入 Rosetta(DE3)菌株 26
3.1.5 SRBSDV 非结构蛋白 P5-1 的原核诱导表达 27
3.1.6 Western blot 检测抗血清的特异性 28
3.1.7 P5-1 在 SRBSDV 侵染的白背飞虱体内的分布 28
3.2 dsRNAs 处理对 SRBSDV 侵染白背飞虱的影响 29
3.2.1 dsRNA 的合成 29
3.2.2 dsP5-1 处理对病毒相关基因在白背飞虱体内的表达的影响 29
3.2.3 dsP6 处理对病毒相关基因在白背飞虱体内的表达的影响 32
3.2.4 dsP9-1 处理对病毒相关基因在白背飞虱体内的表达的影响 35
3.3 干扰单个基因表达明显抑制病毒在白背飞虱体内的复制 38
3.4 dsRNA 处理抑制 SRBSDV 相关基因在蛋白
您可能关注的文档
最近下载
- (正式版)DB61∕T 1486.8-2021 《设施茄果类蔬菜水肥一体化技术规范 第8部分:辣椒基质栽培》.docx VIP
- (正式版)DB61∕T 1486.8-2021 《设施茄果类蔬菜水肥一体化技术规范 第8部分:辣椒基质栽培》.pdf VIP
- 《光伏玻璃工艺讲解》课件.ppt VIP
- 迅达扶梯9300ae产品介绍.pdf VIP
- SL747-2016采矿业建设项目水资源论证导则.pdf VIP
- 重症医学科专科护士工作汇报.ppt VIP
- 云南省茶叶出口影响因素的实证研究.docx VIP
- crrt专科护士汇报ppt.pptx VIP
- 毕业设计(论文)-星型发动机设计.docx
- 除尘器噪音标准.pdf VIP
原创力文档


文档评论(0)