亚洲小车蝗痘病毒增效因子的初步研究.PDFVIP

维普资讯 第 l8卷 5期 中 国 病 毒 学 l8 (5)：478—48l 2003年 lO月 VIR0L0GICA SINIGA October 2003 亚洲小车蝗痘病毒增效因子的初步研究 李永丹，赵朝阳，王丽英 (中国农业大学植保学院昆虫学系，北京，100094) PreliminaryStudyontheEnhancingFactorofOedaleusasiaticusEn LIYong—dan，ZHAO Chao—yang，WANG Li—ying (EntomologyDepartment,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing100094，China) Abstract：Oedaleus asiaticus entomopoxvirus(DaEPV)contains a factor which enhancesthe infectionofMetarhiziumflarovirideinhtegrasshopperOedaleusinfernalis．Whenthespheroidsof OaEPV were dissolved wiht 2×SDS spheroid alkaline solution and centrifuged，the enhancing activityofthesupernatantwas2．5timeshigherthaninthepellet．Theenhancingactivityofspheroid proteinsdependedonthealkaliusedtodissolvehtespheroids．Thegreatestactivitywasdetectedwith spheroidalkalinesolution，followedwiht 0．02mol／L NaOH，andnonewith8mol／Lurea．Spheroid proteinswerefractionatedonasephadexG一200column．Tworfactionswereobtainedna dthesecond rfactionhadhteenhancingactivity．SDS—PAGE indicatedthemolecularweightoftheactivefraction was40kDa． Keywords：OaEPV；Spheroidprotein；Enhancingfactor 摘要：OaEPV经 2×SDS包涵体碱性裂解缓冲液裂解，离心，分别用上清液及沉淀与绿僵菌孢子混合感染黄胫小 车蝗，上清液的增效活性比沉淀大2．5倍。用三种不同方法 (2×SDS包涵体碱性裂解液法，0．02mol／LNaOH裂 解法，8mol／L尿素裂解法)裂解OaEPV所得蛋 白液与绿僵菌混用，生测结果表 明，包涵体裂解液法制备所得蛋 白增效活性最高，NaOH裂解法次之，尿素裂解法制备的蛋白几乎没有增效活性。将 OaEPV 用包涵体碱性裂解 液裂解后，用葡聚糖G一200凝胶柱层析进行分离，出现两个洗脱峰，这两个峰的洗脱液浓缩后进行生物测定，初 步表明增效作用主要为第二个峰的蛋白片段。经 SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳，第二个峰的蛋白片段的分子量为 40 kDa左右 。 关键词：亚洲小车蝗痘病毒；包涵体蛋 白：增效因子 中图分类号：$852．65 文献标识码；A 文章编号：1003—5125(2003)05—0478—40 1959年，Tnaada首次描述 了美州粘虫(Pseud— 增强素 (enhnacin，En)[21。 aletiaunipuncta)的颗粒体病毒 (Pseudale