施氏鲟微卫星的开发及其应用-水产养殖专业论文.docxVIP

资助项目 公益性行业（农业）科研专项（200903046-07）；国家科技基础 条件——水产种质资源平台。 摘要 摘要 Ⅰ Ⅰ 摘 要 施氏鲟（Acipenser schrenckii）属鲟科，目前世界上的鲟科鱼类共 28 种。施氏鲟生活 在我国黑龙江和俄罗斯境内，是我国最具经济价值的珍稀鱼类，具有病害少，寿命长，生 长快等优点。近年来成为养殖的重要对象，并且在我国渔业生产中占有一定地位。本研究 利用 454 测序法开发施氏鲟微卫星标记，共设计了 127 个微卫星引标记并将其应用于如下 研究：?分析施氏鲟性别间差异；?西伯利亚鲟和小体鲟通用性研究；?鉴别达氏鳇、施 氏鲟及其杂交鲟的研究。获得研究结果如下： 1.共开发 127 个微卫星标记，30 个检测个体。其中，25 个微卫星标记扩增出清晰多态 性良好的条带，35 个成功扩增的产物为单态，67 个标记扩增效果不好甚至无扩增产物。 2.发现 6 个微卫星标记中有 9 个等位基因在雌、雄群体中分布比例差异达到 50%以上， 其中， HLJSX194-239bp ， HLJSX201-207bp ， HLJSX209-210bp ， HLJSX210-178bp ， HLJSX215-221bp 5 个等位基因频率雌性群体显著高于雄性群体；HLJSX194-184bp， HLJSX201-214bp，HLJSX210-233bp，HLJSX226-194bp 4 个等位基因频率雄性群体显著高 于雌性群体。 3.微卫星标记在西伯利亚鲟和小体鲟中的通用性分别达 68.75%和 65.63%，统计结果表 明西伯利亚鲟群体的等位基因数和观测杂合度水平都高于小体鲟群体，可充分利用这些位 点对该鲟科鱼类的遗传多样性进行研究，同时可以节省开发西伯利亚鲟和小体鲟微卫星标 记的成本。 4.发现有 5 个特异性标记能够有效鉴别出施氏鲟、达氏鳇及其杂交子代。其中， HLJSX226，HLJSX329，HLJSX332，HLJSX350 4 个标记可以有效鉴别部分施氏鲟和达氏 鳇，HLJSX350 扩增出可以明显地分辨出父母本种群的特有条带，从而可以确定杂交子代 的杂种身份。 关键词：微卫星；施氏鲟；西伯利亚鲟；小体鲟；达氏鳇；杂交鲟；性别；通用性 Ab Abstract Abstract Amur sturgeon (Acipenser schrenckii) is one of the 28 known fish species in the Acipenseriformes, which can be found in the Amur River basin in China and Russia. It is the most economic value in beluga sturgeon of rare fish with many advantages, such as, less disease, long life, grow faster. Chinese A. Schrenckii has become an important object and aquaculture industry has occupies a certain position in Chinese fishery production. In this paper, the 454 pyrosequencing technique was used to sequence partial genome of A. schrenckii according to the standard protocol. A total of 127 microsatellite primer pairs were designed and tested, and these markers were used as follows: Screening the sex-related DNA markers through analyzing DNA differences between female and male; Analyzing the ability of these microsatellite primers amplifying in Acipenser baeri and Acipenser ruthenus; Analyzing DNA differences among of Amur sturgeon (Acipenser schrenckii), kaluga (Huso dauricus) and their reciprocal hybrids. The main result