金匮肾气丸调控FNDC5、BMP2对BMSCs成骨分化的作用.pdfVIP

中国骨质疏松杂志　 ２０１７年１０月第２３卷第１０期　 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓ，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１７，Ｖｏｌ２３，Ｎｏ． １０ １３４６ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ｏｎｌｉｎｅｗｗｗ．ｗａｎｆａｎｇｄａｔｅ．ｃｏｍ．ｃｎ　 ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００６⁃７１０８ ２０１７ １００１７ ·药物研究 · 金匮肾气丸调控 ＦＮＤＣ５、ＢＭＰ２ 对 ＢＭＳＣｓ成骨分化的 作用 １ ２ １ １ １ １ １ １∗ 张玉卓 　 任辉 　 余翔 　 许银坤 　 许献光 　 丁富平 　 黄进 　 张进 １． 广州中医药大学，广东 广州５１０４０５ ２． 广州中医药大学第一附属医院，广东 广州５１０４０５ 中图分类号： Ｒ６８　 　 文献标识码： Ａ　 　 文章编号： １００６⁃７１０８（２０１７） １０⁃１３４６⁃０７ 摘要： 目的　 研究金匮肾气丸通过调控 ＦＮＤＣ５、ＢＭＰ２ 基因对 ＢＭＳＣｓ 成骨分化的影响。 方法　 采用全骨髓贴壁法培养 ＢＭＳＣｓ，分别用大鼠空白血清和高、低剂量金匮肾气丸干预ＢＭＳＣｓ成骨分化过程。 采用ＣＣＫ８检测金匮肾气丸对ＢＭＳＣｓ 的增 殖、毒性作用；ＡＫＰ 活性检测细胞上清成骨分化活性；ＡＬＰ 染色检测细胞成骨分化能力；反转录⁃实时荧光定量技术（ＲＴ⁃ｑ ＰＣＲ）检测ＦＮＤＣ５、ＢＭＰ２ ｍＲＮＡ表达；Ｗｅｓｔｅｒｎ⁃ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测 ＦＮＤＣ５、ＢＭＰ２ 蛋白表达。 结果　 ＣＣＫ８结果示，从第 １天到第７ 天，各组细胞增殖整体呈上升趋势，７ 天后各组细胞增殖呈下降趋势，且各组增殖（ＯＤ值）无统计学差异。 含药血清干预 ＢＭＳＣｓ　 ３天时，ＳＧ组ＡＫＰ活性明显高于ＣＯＮ（Ｐ＜００１），ＳＤ组与ＣＯＮ组差异虽无统计学意义，但高于ＣＯＮ组；７ 天时，ＳＧ 和ＳＤ两组ＡＫＰ活性均高于ＣＯＮ组（Ｐ ＜００５）；ＡＬＰ染色结果示：ＳＧ组和ＳＤ组ＡＬＰ染色阳性率均高于ＣＯＮ组，而ＳＧ组 ＡＬＰ染色率高于ＳＤ组。 干预３天时，ＳＤ组ＦＮＤＣ５ ｍＲＮＡ表达较 ＣＯＮ、ＳＧ组显著上调（Ｐ ＜００５）；７ 天时，ＳＤ、ＳＧ组 ＦＮＤＣ５ ｍＲＮＡ 表达均较ＣＯＮ组显著上调（Ｐ＜００５），ＳＤ组高于ＳＧ组（Ｐ＜００５）。 ３、７天时ＳＧ、ＳＤ组ＢＭＰ２ ｍＲＮＡ表达均较ＣＯＮ组 显著上调（Ｐ＜００１）。 干预第３、７天时，ＳＧ、ＳＤ组ＦＮＤＣ５、ＢＭＰ２蛋白水平均明显高于ＣＯＮ组（Ｐ ＜００５）。 结论　 金匮肾气 丸含药血清可能通过上调ＦＮＤＣ５、ＢＭＰ２基因水平来促进ＢＭＳＣｓ成骨增殖、分化。 关键词： 金匮肾气丸；ＦＮＤＣ５；ＢＭＰ２；基因；成骨分化 Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆＪｉｎｋｕｉ Ｓｈｅｎｑｉ Ｐｉｌｌｓ ｏｎ ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＭＳＣｓ ｂｙ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ＦＮＤＣ５ ａｎｄ ＢＭＰ２ ｇｅｎｅｓ １ ２ １ １ １ １ １ １∗ ＺＨＡＮＧ Ｙｕｚｈｕｏ ，ＲＥＮ Ｈｕｉ ，ＹＵ Ｘｉａｎｇ ，ＸＵ Ｙｉｎｋｕｎ ，ＸＵ Ｘｉａｎｇｕａｎｇ ，ＤＩＮＧ Ｆｕｐｉｎｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｊｉｎ ，ＺＨＡＮＧ Ｊｉｎ １． Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５１０４０５，Ｃｈｉｎａ ２． Ｔｈｅ Ｆｉｒｓｔ Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ５１０４０５，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＺＨＡＮＧ Ｊｉｎ，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｊｉｎ＠ｇｚｕｃｍ．ｅｄｕ．ｃｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｊｉｎｋｕｉ Ｓｈｅｎｑｉ Ｐｉｌｌｓ ｏｎ ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ