WCT抗血清的制备及陕西省地灵花叶病害研究.pdfVIP

第一章文献综述 第一部分WCT抗血清的制各 第一章文献综述 抗植物病毒药物的研究是今年来国内外病毒学研究的重要领域之一，特别是抗病毒 制剂的研究最为热门。多羟基双萘醛(WCT)是一种从锦葵科植物中提取出来的抗病毒 药物，对病毒具有较高的活性，吴云锋等通过近20年的研究，对WCT的作用范围及效 果已经研究得比较详细，但是对WCT的作用机理及在植物中的分布还没有进行深入的研 究，主要是因为目前用于微量药物研究的方法都比较复杂。本研究希望能够找到一种简 单、快捷、廉价的分析方法来检测WCT的分布和存在，为下一步研究其作用机理打基础。 物样品中微量药物的分析方法是药物理论和应用研究的基础，这对于农药同样适 用。在研究农药的代谢、残留(包括作物、土壤、水源、大气及食物中的农药残留分析)、 作用机理及评定农药的质量标准时，都要对目标化合物进行定性或定量的检测，因而特 种农药的检测方法应运而生，并且直接影响农药的研究、开发和应用。 目前用于农药检测的方法有气谱法、高压液相色谱法(HPLc)、气相色谱一质普联用 仪器分析法及免疫分析法。多年来，HPLC或Gc与质谱联用承担着农药残留的常规检测 任务，但其需要复杂的前处理、昂贵精密的仪器设备、熟练的专业技术人员，且完成一 次分析需要的时间长、成本高，己难以满足环境监测中大量样品的快速检测需要。因此 人们积极寻找一种简单、快速、价廉的农药分析方法，农药免疫分析方法就是人们这种 努力的结果，它具有灵敏、特异、简单快速、不需昂贵的仪器等优点，近年来发展很快。 农药免疫分析的研究是一个新兴的多学科交叉的研究领域，涉及到很多基础学科的 知识，如有机化学、光谱学、免疫学和生物化学等。近年来进展很快，并显示出了强大 的技术优势和发展前景，己受到越来越多的农药研究工作者的重视。本文对农药免疫分 析技术中涉及的免疫学技术、农药免疫分析技术的研究进展及其研究程序做一综述，以 期为致力于这方面研究的工作者提供一个整体的思路和系统的理论体系。 1．1免疫分析技术概述 免疫技术是指利用免疫反应特异性的原理建立的各种检测与分析技术以及建立这 些技术的各种制备方法，主要包括用于检测抗原或抗体体外免疫反应的免疫检测技术和 用于分析研究机体细胞免疫功能与状态的细胞免疫技术以及用于建立免疫检测方法的 免疫制备技术“。。…。 用于检测抗原或抗体的免疫检测技术按抗原抗体反应性质不同可分为凝聚性反应 检测技术和标记抗原抗体反应检测技术。包括放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分 析、化学发光免疫分析等。农药免疫分析中主要应用标记免疫分析技术。它是免疫学理 论和标记技术相互结合的产物，其基本理论是抗原抗体反应，但借助于标记技术而实现 WCT抗血清的制备及陕砺省地灵花叶病害研究 对目标物的检测。下文将对标记免疫分析技术做一基本概述。 1．1．1免疫学概念和基础理论 免疫是生物体识别和清除抗原型异物的一种生理性反应。免疫学是研究生物体对抗 原物质发生免疫应答的理论及其方法学的--f]生物医学科学。它起源于抗微生物的感染 免疫”。 1．1．1．1抗原与抗体 所谓抗原是指一切能刺激机体的免疫系统发生特异性免疫应答，并能与相应的免疫 应答产物在体内或体外发生特异性结合的物质。大多数抗原是由大分子蛋白质组成，但 只是抗原上有限部位的特殊分子结构能与其相应抗体结合，称此部位为抗原决定簇。作 为抗原需要包括两个方面的特性：免疫原性和反应原性。免疫原性是指抗原能够刺激机 体特定的免疫细胞，使之活化、增殖、分化，最终产生抗体形成免疫应答反应的特性； 反应原性是指抗原能够与其诱导产生的抗体在体内或体外发生特异性结合，引起免疫反 应的能力。构成抗原免疫原性的条件有以下4个方面；①异物性。是指抗原与所刺激的 机体的自身物质的差异性。②分子大小。分子量小于1000的物质通常无免疫原性，分 子量小于5000的物质免疫原性较弱，分子量大于10000的物质有良好的免疫原性。在 一定条件下，分子量越大，免疫原性越强；③物质的化学组成、分子结构及立体构象。 一般来说，分子结构和立体构象越复杂，其免疫原性愈强。④物质状态。颗粒性抗原的 免疫原性通常比可溶性抗原强。抗原包括完全抗原和不完全抗原(半抗原)。完全抗原是 一些大分子物质(分子量大10000)，如蛋自质、细菌、病毒等，它们既有免疫原性又有 反应原性。不完全抗原(半抗原)是是指那些有反应原性而没有免疫原性的物质