人工种子制作.pptxVIP

;本 章 内 容;本节课主要内容;;;;;;;;;;;;传统反应器改造;新型反应器设计:超声雾化反应器;第四节 人工种子;;;;;渗透压法：不同发育时期的胚状体对渗透压的要求不同，用一定的渗透压使胚状体停止在某一阶段，然后再使其同步发育。 通气法：细胞分裂旺盛时有大量气体（如乙烯等）生成。可以通过在培养基中通入乙烯或氮气控制细胞同步分裂。 分离筛选法：用不同孔径的筛网将不同发育时期的胚状体分离开来，也可以采用密度梯度离心法来选择不同发育期的胚状体。;（2）人工种皮制作;（3）人工胚乳配制;藻酸钠等水溶性凝胶与Ca2+进行离子交换后凝固;;贮藏与发芽;;;;;;;; ;1943年，white在体外培养感染了烟草花叶病毒（TMV）的马铃薯，并用枯斑寄主法测定了其根不同部位的病毒含量，发现根尖部位的病毒含量比其他部位少，甚至不存在病毒。随着往成熟区的推移，病毒含量越来越高。 这一发现为茎尖培养脱除病毒提供了理论依据。;黄瓜花叶病毒（CMV） 百合丛簇病（CTLV） ; ;番茄黄瓜花叶病毒病症　　　　　水稻矮缩病症;一、植物脱毒概念;（一）物理方法 1、高温处理法 脱毒原理： 一些病毒对热不稳定，在高于常温的温度下（35-40℃）易钝化失活，但寄主植物的组织很少或不会受到伤害。 （1）温汤浸渍处理脱毒法  材料置于50℃左右热水中浸渍几十分钟到数小时。 特点：简单易行，成本低，但易使材料受伤。 适用：甘蔗、木本植物和休眠器官的处理。 （2）热空气处理脱毒法  将植物用35～40℃的热空气处理2～4周或更长时间。 特点：损伤较小，操作简便，须严格控制温度时间 适用：多数植物 ; 热处理脱毒法优缺点 优点： 要求的设备条件比较简单，脱毒操作也比较容易。 缺点： 脱毒时间长，脱毒不完全； 对球状病毒和类似纹状的病毒以及类菌质体所导致的病害才有效，对杆状和线状病毒的作用不大。 热处理后只有一小部分植株能够存活。;2、低温处理法 低温处理又称冷疗法，降低温度能使病毒活力下降。;（二）化学方法 抑制植物体内病毒的复制。常用的化学药品有放线菌酮、三氯??核苷、孔雀绿、硫脲嘧啶、8-氮鸟嘌呤。 优点：抑制病毒复制。 缺点：不能使病毒失活，并对植物有毒害作用。 ;（三）生物方法 1.茎尖培养 有效的植物脱毒方法。茎尖通常取材0.2-0.5mm大小。茎尖培养结合高温处理法脱毒效果进一步提高。 优点：周期短，效率高。 缺点：茎尖小，营养、水分含量低，对培养基要求高，剥离技术要求也越高，植物的存活率低。 ;热处理结合茎尖脱毒培养 ;龙牙百合茎尖;2.茎尖微体嫁接脱毒 ???木本植物茎尖培养难以生根形成植株。为了克服这个困难，可将实生苗砧木培育在培养基上，再从成年无病毒树枝上切取茎尖（0.14-1.0mm），在砧木切断面上进行试管微体嫁接，就可获得无病毒的幼苗。 利用这个方法，柑橘类嫁接成活率为30%-50%，移栽成活率约95%，嫁接两年后即可结实。 ;3.愈伤组织脱毒 植物器官或组织经诱导产生愈伤组织，再分化培养长成小植株。由无病毒细胞产生的愈伤组织可以获得无病毒苗。有些愈伤组织细胞病毒浓度较低，在愈伤组织细胞快速分裂过程中，病毒的复制能力衰退或丢失，因此也可以获得无菌苗。; 4.珠心胚培养脱毒 ??? 柑橘类多胚品种中除了一个受精胚以外，尚有多个由珠心细胞形成的无性胚，称为珠心胚。珠心胚与维管束系统无联系，因此由珠心胚产生的植株全部均无病毒。但珠心胚大多是不育的，必须分离培养才能发育成正常的幼苗。 珠心胚培养技术对除去柑橘主要病毒，如引起银屑病、叶脉突出病、柑橘裂皮病、柑橘速衰病等的病毒，都十分有效。;（一）直接检测法 （二）指示植物法 1、摩擦接种法 2、嫁接法 （三）电镜法 （四）抗血清检测法 （五）分子检测技术 ;