第九部分基因诊断.pptVIP

第九章 基因诊断 第一节 基因诊断的概念 及常用技术 基因诊断—利用分子生物学技术，从 DNA/RNA水平检测基因的存在,分析基因的结构变异和表达状态，从而对疾病作出诊断。 二、基因诊断常用方法 ㈠ 核酸分子杂交 ㈡ PCR ㈢ DNA序列测定 ㈣ DNA芯片技术 (一) 核酸杂交 基本原理-------核酸变性和复性理论 即双链的核酸分子在某些理化因素作用下双链解开，而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。因此应用已知碱基序列的单链核苷酸片段作为探针，就可检测样本中是否存在与其互补的同源核苷酸序列。 核酸杂交的关键要素 probe DNA target DNA signal detection 核酸杂交方法分类 按作用环境大致分为固相杂交和液相杂交两种类型。 固相杂交是将参加反应的一条核酸链先固定在固体支持物上，一条反应核酸游离在溶液中。 液相杂交所参加反应的两条核酸链都游离在溶液中。 固相杂交分类 Southern 印记杂交 Northern 印记杂交 斑点杂交 原位杂交 Northern杂交 用于RNA的检测，能对组织细胞中总RNA或mRNA进行定性和定量分析。 斑点杂交（Dot blot） 可用基因组中特定基因及其表达的定性及定量分析，方法简单、快速灵敏、样品用量少；其缺点是不能鉴定所测基因的分子量，特异性不高，有一定比例的假阳性。 原位杂