实验二+蛋白质及氨基酸的显色反应.pptxVIP

实验二、 蛋白质及氨基酸的显色反应 ;实验二、蛋白质及氨基酸的显色反应 ;Ⅰ 、双缩脲反应 (Biurea reaction) ;紫红色铜双缩脲复合物分子结构为： ;操作步骤 一、取少量尿素结晶，放入干燥试管中，用微火加热使尿素熔化。熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。冷却后，加 10%NaOH溶液约1mL，振荡混匀，再加入1%CuSO４ 溶液1滴，振荡之。观察出现的粉红颜色。（避免添加过量硫酸铜，生成的蓝色氢氧化铜能掩盖粉红色）。 二、取另一支试管，加 1mL蛋白质溶液和10%氢氧化钠溶液2mL，摇匀，再加1%硫酸铜溶液两滴，随加随摇，观察紫玫瑰色的出现。 ;Ⅱ 、茚三酮反应 (Ninhydrin reaction);Ⅱ 、茚三酮反应 (Ninhydrin reaction);操作步骤 一、取 2支试管分别加入蛋白质溶液和0.5%甘氨酸溶液1mL，再加0.5mL 0.1%茚三酮水溶液混匀，在沸水浴中加热1~2min，观察颜色由粉色变成紫红色再变蓝。 二、在一小片滤纸上滴上一滴 0.5%的甘氨酸溶液，风干后，再在原处滴0.1%的茚三酮乙醇溶液一滴，在微火旁烘干显色，观察紫红色斑点的出现。 ;Ⅲ、黄色反应 (Xanthoproteic reaction) ;操作步骤: 一、取一支试管加 4滴0.5%苯酚溶液，再加浓硝酸2滴，观察黄色