实验1 细菌的培养方法.pptx

微生物学实验一 ;1. 实验室规则 2．录相：细菌标本的采集和细菌的接种方法 3．操作： ⑴ 细菌的接种法 （液体、半固体、固体 1套/3人） ⑵ 空气中细菌的检查 （沉降法 血平板 1块/6人） ⑶ 呼吸道细菌的检查 （咳碟培养 血平板 1块/3人） ⑷ 随身物品的细菌检查 （普通平板 1块/3人） 4. 材料： ⑴ 大肠杆菌斜面培养物 （1支/6人） ⑵ 碘酒、75%酒精、棉签等 （1套/6人） ;教学目标;实验室规则;5. 实验室不得高声喧哗，保持安静，守秩序，不要随便走动，以免影响他人实验和安全。 6. 如果发生实验室不慎，吸入菌液、划破手指、培养物破损传染物外溢，应及时报告，及时处理。 7. 实验过程中应注意节约实验材料、爱护仪器，损坏器材要及时报告、登记、并作相应的赔偿。实验室内物品，未经老师许可，严禁带出室外。 ;8. 每次实验之后，所用物品放???原处。需要培养或消毒处理的物品及时送到指定地点，用过的涂菌载玻片放入小桶内，不得乱丢乱放。 9. 实验完毕，整理桌面，肥皂洗手，值日生打扫实验室卫生，关好水电门窗，待老师检查后方可离开。; 细菌和其它生物一样，大多数属异养菌，必须从周围环境中摄取营养，进行新陈代谢及生长繁殖等生命活动。 人为地提供细菌生长繁殖所需的营养物质（适宜的培养基）和创造适合细菌生长繁殖的有利条件如温度、湿度、气体等，能使细菌在体外迅速生长繁殖。;细菌生长繁殖的条件：;一、细菌生长繁殖所需营养;（一）培养基（culture medium）;; ;SS琼脂培养基（Salmonella-Shigella agar） ;5）厌氧培养基;（2）根据物理状态分;嗜冷菌（10-20℃） 嗜温菌（20-40℃）：绝大多数病原菌 嗜热菌（50-60℃）;嗜中性菌（pH 6.0-8.0） 嗜酸性菌（pH 5.5） 嗜碱性菌（pH 8.5） 多数病原菌最适酸碱度为pH 7.2-7.6 霍乱弧菌耐碱(pH 8.4-9.2) 结核分枝杆菌耐酸(pH 6.5-6.8);氧和二氧化碳;2、细菌的二氧化碳培养法;; 细菌的分离接种是人工分离培养细菌的重要步骤，是微生物学的基本技术之一，其目的是从含多种细菌的患者标本中分离出单一病原菌，从而可以进行感染性疾病的病原学诊断。 同时，在细菌学的研究，生物制品如疫苗、类毒素、抗毒素和免疫血清等的制备，基因工程及工农业生产等方面，人工培养分离细菌，都有着极为重要的意义。 ;琼脂平板划线分离接种法（固体培养基） 划线法 斜面培养基接种法（蛇形划线法） 半固体培养基接种法（穿刺法） 液体培养基接种法（乳磨法）;固体平板培养基的划线接种;划线接种手法;平板划线接种的结果——菌落观察;;斜面培养基接种——蛇形划线;半固体培养基的穿刺接种及结果观察;液体培养基的乳磨接种手法;液体培养结果观察; 空气中没有营养物质，且受日光中紫外线的作用，细菌一般不能繁殖。然而，土壤中有大量的细菌存在，可随尘埃散布到空气中；寄生在人和动物呼吸道及消化道中的细菌也能通过各种途径散布到空气中，使得空气中也有一定量的细菌存在。 空气中细菌的数量和种类随地区、季节和人口密度的不同而不同。通常，可测定单位体积空气中所含细菌的数量来评价空气的污染程度。; 沉降法是利用含有细菌的尘粒或气溶胶粒因重力作用自然下降到培养基表面，通过细菌培养，计数菌落数，粗略评估空气中细菌含量。;操作：将血平板打开盖，放到教室的四个角上，静止15分钟后，合上盖送37℃孵箱培养。 ; 人体呼吸道与外界相通，常常有不同种类的细菌存在。其中，1/4为需氧菌，3/4为厌氧菌。这些细菌常是条件致病菌，在一般情况下并不致病。有时，正常人的呼吸道中也有致病菌的存在，如肺炎球菌、脑膜炎球菌、乙型链球菌、流感杆菌等，是引起疾病传播的一个重要因素。 由于寄居人体的关系，这些细菌对营养的要求较高，常需要用含血液成分的培养基进行分离。;操作方法： 打开血平板，将平板置于口腔前约15cm处，对准培养基表面用力咳嗽3～4次，然后盖好平板盖，放置于37℃孵箱内培养24小时后观察结果。 结果判断： 平板上可有不同的菌落长出，观察菌落的形态、大小及溶血现象。; 人体的皮肤表面有多种细菌存在，用水洗手或用肥皂洗手，可以除去皮肤上的污垢和灰尘，从而减少手上细菌数量，但并不能有效的杀死细菌。日常医疗、试验工作中常用的化学消毒剂如碘酒、酒精等有很好的杀菌作用，在临床医疗中广泛应用。;1、在平板底部用笔划分8个区，分别标记为①②③④⑤⑥⑦⑧。 2、用右手食指在①区上轻轻按一下，然后用肥皂洗手后，用无菌棉签拭干手