标记免疫分析技术2 数据处理.ppt

（五）数据处理（datahandling）： 通过r-计数器测量： ? .总放射性T：加入各反应试管中标记抗原的放射性计数； .结合部分放射性B：反应达到平衡时，标记抗原抗体复和物的放射性计数； .游离部分放射性F：反应达到平衡时，呈游离状态的标记抗原放射性性计数。 ?非特异性结合 NSB：指标记抗原与结合剂（抗体）以外物质的结合。 1.作图法（graphic method） 以标准品浓度为横坐标，以反应参数（B/T,B/F,B/B0)为纵坐标，绘制标准曲线。 1）.普通坐标纸绘图法 2）.半对数坐标绘图法作图法 3）.双对数作图法 Logit-Log模型： ?以LogX为横坐标， 以Logit Y 为纵坐标 Logit y = Logit B/B0 = Logit y = a - b logx 2.数学模型法 用某一函数式来描述剂量反应关系。 .四参数Logistic模型 .五参数法， （六）.质量控制（quality control ，QC） 1.意义： 质量控制的实质：控制误差，监督测定结果。 质量控制的目的： 近期目的：通过分析判断结果的准确度和精密度，根据质控指标决定结果的取舍。 远期目的：将质控作为常规的鉴定方法，发现分析质量差的原因，淘汰改进不稳定的方法，建立新方法。 2.误差及来源： 1）.随机误差(random error) ：由多种难以确定且无法控制的原因引起。无固定倾向性，呈正态分布。 评价指标：精密度 2）.系统误差(systematic error) ：常由确定原因引起，查明原因可以纠正。 评价指标：准确度（偏差） 3.质控指标： （1）精密度（precision）； （2）准确度（accuracy）； （3）灵敏度（sensitivity）； （4）特异性（specificity）； （5）稳定性（stability）。 【即刻性质控】 在开始进行质控时，只需要有3个质控血清测定值即可进行质控。当这组数据扩大到20次有效值时就可以计算RCV的X，SD。 方法： 以下条件之一即为不合格 1. 高、中、低质控样本，有两个大于或小于3SD; 2. 高、中、低质控样本，有两个大于2SD，并在同一方向； 3.高、中、低质控样本都大于或小于1SD并在同一方向。 （1）精密度（ precision ）： . 指测定值与测定均值间的符合程度，即指实验结果的重复性。以标准差（Standard Deviation, SD）、变异系数（coefficient of variation, CV）等离散度指标表示。 a 标准差（SD）：表示测定值与测定均值的偏离程度。 ? b c 反应误差关系（RER） 是衡量同批测定中，反映复管平行性的指标。可估计一次实验的总精密度。一般要求RER小于0.04，如大于0.12应整批舍弃。 ? d.精密度图： 衡量剂量反应曲线各剂量点的精密度，评价剂量反应曲线的质量和可用范围 。 （2） 准确度（accuracy）： 指测定值与真值的符合程度，即表示测定结果的准确程度。其偏离真值的误差叫偏差。 真值-测定值 偏差= X100% 真值 检测偏差的方法： 回收实验： 回收管测得值 回收率 = X100% 对照管测得值+回收管加入量 （3） 灵敏度（sensibility）： 可检测到的最小化学量。常以“O”标准管法来确定。 ? 10个以上“O”标准管结合率均值加减2SD 灵敏度常以标准曲线的斜率来表示。线性部分斜率越大，表示灵敏度越高可测范围较小；线性部分斜率越平坦，表示灵敏度越差，可测范围较宽。 所以对放射免疫分析方法灵敏度的要求，并非越高越好，应根据测定目的而定，应兼顾灵敏度与可测范围。 （4）.特异性（specificity）： 用结合剂与被测物的类似物交叉反应的程度来表示，交叉反应越小，特异性就越好，测量方法就越好。 ? （5）.稳定性（stability）  评价稳定性常用参数有： ? （1）.“O”标准管结合率：应稳定在40%-60%之间。 （2）.非特异性结合率： NSB%是指标记物与特异性结合剂以外物