微生物无菌接种、分离和纯化.pptVIP

实验八 微生物无菌接种、分离和纯化技术 实验目的 学习和掌握微生物无菌接种技术 学习和掌握超净工作台的使用方法 学习和掌握涂布分离和划线分离等微生物分离纯化技术 实验原理 微生物无菌接种技术 在无菌条件下，用接种工具从原菌种中挑取少许菌体，接入到新培养基上扩大培养的技术 常用接种工具 接种环：划线、斜面转接、液体培养基 接种针：固体穿刺培养 接种勾：多用于丝状微生物转接 接种铲：多用于丝状微生物转接 无菌移液管： 液体培养基间的接种 回转螺旋 杆 手柄 实验原理 无菌接种技术的注意事项 要点：防止污染，严格的无菌操作 接种场所必须进行严格的消毒处理（接种间） 实验室：在超净工作台上进行 接种者的双手要进行消毒处理，一般用75%酒精或0.01%新洁而灭擦洗 接种工具、管、瓶口接种前后要通过灼烧灭菌 塞子不能脱手 实验原理 于接种之前打开接种室和超净工作台紫外灯消毒30min，同时打开风机 接种时必须关闭紫外灯 无菌接种技术的基本操作 转接斜面 （斜面接种） 演示：斜面转接 1、标记 2、左手持斜面 3、灼烧接种环 4、取塞，灼烧管口 5、冷却，取菌转接 6、重烧管口，盖塞 7、重烧接种环 微生物的分离纯化技术 分离：从混杂的群体中把各种微生物分开 纯化：进一步分离，得到纯培养物 菌落纯：由一个或几个相同种细胞所得到的群体 形态、结构、生物学特性基本相同的群体 研究一般特性 菌株纯：由一个细胞繁殖得到的后代（纯培养） 应用研究、生产 微生物的分离 常用菌种分离方法——固体平板分离 倒平板法 （Pour-plate Technique） 涂布平板法（Spread-Plate Technique） 平板划线法 （Streak-Plate Technique） 倒平板法 涂布平板法 1、取样 2、沾燃烧酒精 3、灼烧 4、涂布 平板划线法 分区划线分离要点： 仅第1次划线需要取菌。 其他每区划线之前一定要把残余的菌体烧掉；待接种环完全能却后通过前1区划线 相隔的区域不要交叉 接种环要在培养基表面划线，不要空划，也不要划破培养基 整个过程要无菌操作 思考题 微生物接种时，采取哪些措施来防止杂菌污染？ 下一次预习 实验9和10 实验内容：细菌生理生化反应试验和pH对大肠杆菌生长的影响 * *