生物转化的类型和机制.pptVIP

限制因素的突破方法 1）利用体外进化技术改造酶提高对映体选择性； 2）研究固定化技术提高酶在有机溶剂中的活性和稳定性； 3）研究循环技术使酶能够反复使用； 4）研究动力学拆分使酶能够进行对映体转换的催化反应。 以钯碳为第二种催化剂，使S-构型化合物外消旋化；用来源于C.antarctica的脂肪酶对外消旋体苯乙胺进行立体选择性酰化反应的动力学拆分过程 一些利用脂肪酶制备药物关键中间体的实例 关键中间体 药物 抗抑郁药帕罗西汀， 拆分得到(S)-?-甲基-?-乙酰硫代丙酸 抗高血压药卡托普利 拆分得到(2R,3S)-4-甲氧苯基缩水甘油酸甲酯 抗心绞痛和高血压药地尔硫卓 拆分得到手性侧链?-氨基-N-苯甲酰基-(2R,3S)-3-苯基异丝氨酸 抗肿瘤药紫杉醇 拆分消旋体 非甾体消炎药（S）-奈普生 S-(-)-乙酸酯 免疫抑制剂脱氧精胍菌素 拆分得到D-泛酸内酯 辅助药D-泛酸 二、环氧化物水解酶（一）环氧化物水解酶的定义和作用 环氧化物水解酶催化一份水分子加入到环氧化物分子中的环氧乙烷部分，形成相应的1-2二醇。这种酶广泛地存在于自然界中，如植物、昆虫、细菌、真菌和哺乳动物等。 除了这种酶在不同的生物体内具有独特的功能外，环氧化物的酶触反应代表了这一类酶具有重要的生物化学作用，因为：在很多具有生物活性作用的非生物合成化合物的降解过程中，发现很多中间产物为环氧化物；另外，环氧化物结构中的环氧乙烷部分由于其具有亲电子作用，而具有很强的化学反应性，它有可能与很多生物亲核物质进行反应。 环氧化物水解酶的种类 目前已经发现了5种这样的酶：可溶性（也称为胞质）环氧化物水解酶（soluble epoxide hydrolases，sEH）、微粒体环氧化物水解酶(microsomal epoxide hydrolases，mEH)、白三烯A4环氧化物水解酶(leukotriene A4 hydrolases，LT A4 H)、胆固醇环氧化物水解酶以及hepoxilin水解酶。 一些微生物环氧化物水解酶对映体选择性地水解外消旋体环氧化物的实例 （二） 环氧化物水解酶的作用机理和结构特征 除了对哺乳类的微粒体环氧化物水解酶（mEH）的作用机理有所深入研究外，对其他有关的这类酶的作用机理几乎没有什么研究，但可以认为，这类酶的作用机理应该是相近的。 一般认为，mEH通过反式（trans）进攻环氧乙烷来水解环氧化物，这一亲核进攻主要在立体位置上位于纸平面后的碳原子上进行。利用取代基不同对水解速率变化的效应研究，以及动力学溶剂同位素研究，结果支持这一假设。 还有一种普遍可以接受的反应机理是：先通过酶分子中的专一的组氨酸残基来活化水分子，然后由被活化了的水分子直接进攻环氧化物中的环结构部分。 环氧化物水解酶催化环氧化物水解的一般过程 Agrobacterium radiobater AD1环氧化物水解酶的催化机理 在大多数情况下，较为暴露的碳原子被优先受到攻击，因此，k1k2 、k4 k3。 环氧化物水解酶生物转化的四种途径 （三） 环氧化物水解酶的底物特异性 1、单取代环氧化物； 2、苯乙烯氧化物型的环氧化物； 3、双取代环氧化物。 带有各种不同取代基的环氧化物 三、糖苷化酶与糖基转移酶 寡糖、糖脂、糖肽、糖蛋白、蛋白聚糖以及其他一些含糖化合物在生物体内具有广泛的生理作用，特别是不少含糖化合物具有特殊的药理活性，从而激发了药物研究工作者的研究热情，使之成为当今药物开发研究的一个重要分支。 三、糖苷化酶与糖基转移酶 目前很多已经应用的微生物药物都是糖苷化合物，如具有抗菌、抗虫、免疫调节、除草和生长调节等生物活性的大环内酯类糖苷化合物，以及蒽环类抗肿瘤抗生素等。尽管通过化学合成的方法可以形成特异性的糖苷键，但其区域专一性或立体专一性合成的效率往往是低下的，而利用酶或微生物进行转化的方法来合成各种糖苷键，是近年来一个新的研究领域。 糖基转移酶 生物催化糖苷键的酶包括两个大类，即糖基转移酶（glycosyltransferase）和糖苷化酶（glycosidase）。在一个合适的反应系统中，前者可以有效地和选择性地催化供体上的糖残基转移到受体分子上，从而形成新的糖苷化合物。利用糖基转移酶催化生成糖苷化合物的优点是较高的转化率和选择性，但其缺点是需要有一个比较复杂的提供糖基的供体，且该基团对酶来说具有很大的隐蔽性。 糖苷化酶 相反，利用糖苷化酶催化反应，能够催化比较简单的糖基供体，甚至在某些条件下，可以直接将单糖化合物与受体形成糖苷键，且很容易用粗酶来进行催化反应，其主要的缺点是在某些情况下，区域选择性不够高。 1、糖苷化酶催化的寡糖合成 催化该反应时的糖基供体可以是单糖、寡糖或活化的糖苷化合物。该酶催化反应时与底物形成一个