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宗明平，陶冠军，李 崎，顾国贤
(江南大学教育部工业生物技术重点实验室，江苏无锡，214122)
摘要 建立了1种采用高效液相法测定啤酒中异a一酸顺／反异构体的方法。样品通过异辛烷液液萃取获得，
STAR mmX250
然后使用PurospherRPls(4．6 mm，5弘m)色谱柱，在甲醇一乙酸铵缓冲液作为流动相条件下等
梯度分离，分高在50rain内完成。依据ESI—MS的选择性，使用高效液相色谱一二极管阵列检测器一电喷雾质谱
靠。最低检测限0．21
mg／L。
关键词 啤酒，异『酸顺／反异构体，HPLC-DAnESI-MS
啤酒是一种包含很多不同成分的复杂胶体溶液，
据鉴定含有超过800多种特色风味成分[1]。啤酒的
ASBC(美国酿造化学家协会)提供，异辛烷为分析
主要风味包括源于酒花的苦味、源于乙醇的醇特征和 纯，乙腈和甲醇为色谱纯，水为超纯水。啤酒样品为
源于CO：的碳酸感等。苦味是啤酒口味的重要特征 市售。
之一，主要来自酒花中不具有苦味的Q一酸异构产 1．2仪器
物[z3。酒花在麦汁煮沸时添加后，其中的a一酸(合薇
草酮、荐草酮和加萑草酮)受热异构化为6种相应在 PlatformZMD
MS，Waters
C。位置差相异构化的顺一、反一异a酸[3]。这些异a一酸
列检测器(DAD，美国Waters公司)。
赋予啤酒80％的苦味[4]。据研究[5]，同分异构体的
1．3标样溶液的配制
苦味强度不同。
mL
酸化甲醇的配制：加0．5 H。PO。(85％)于
异a一酸的6种顺／反异构体结构非常相似，仅在
1000
mL甲醇中。
酰基侧链和手性中心有所不同。加之稳定性有限，给
标准储备液的配制：称取标准样品20mg，用酸
样品前处理和色谱分离带来很大困难。目前EBC
化甲醇溶解于100mL棕色容量瓶中，并于2～4℃
(欧洲酿造协会)和ASBC(美国酿造化学家协会)官
保存。
方方法使用的标准化合物DCHA—Iso只含有3种反
1．4样品制备
式一异a酸，因此异a一酸分离后的定性显得尤为重要，
100
mL脱气的啤酒经HCl酸化后用250mL异
DeCooman和Diedrieh
早期Luc Harms等人[6’73使
min
辛烷于500mL分液漏斗中萃取，用力振荡20
用磷酸、柠檬酸作缓冲液实现了异a一酸各顺／反异构
后，静置分层，收集异辛烷层(约125mL)，并用旋转
体的分离，PuseckerEs]在此基础上实现了L(3-NMR
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