分子生物学第22章节资料精.pdfVIP

第二十二章 核酸剪接 在各级生物中都存 割裂基因(Interrupted genes)。在低等真核生物的基因中割裂基因 仅占很小的一部分，但是在高等真核生物基因组中绝大部分都是割裂基因。由于内含子的 数目和长度不同使基因间长度差别很大。 一个典型的哺乳动物基因中约有7~8 个外显子， 分布 16 kb 左右的范围内。外显子较短(100~200bp)，内含子较长(1 kb) 。 由于基因是割裂结构而它的 mRNA 却是非割裂结构，所以初级转录物就需要进行加 工。初始转录产物称为 pre-mRNA ，具有和基因一样的割裂结构。去除内含子后的成熟 mRNA 约为2.2kb 。内含子的去除过程就称为RNA 剪接或剪接(RNA splicing) 。 高等真核生物中，核基因与其产物间长度上存在差异，而这种差异的本质是由核RNA 的性质决定的。核RNA 的平均长度比mRNA 长，非常不稳定，序列的复杂程度也非常高， 称为不均一核RNA(heterogeneous nuclear, hnRNA)。其中包括pre-mRNA ，也包括其它的转 录物(即那些最终没有形成mRNA 的部分) 。 hnRNA 的物理结构是一个核糖核蛋白颗粒(hnRNP)，颗粒中蛋白质包围着hnRNA 。体 外研究表明，hnRNA 的形状是一个球体和一个与之相连的纤维状结构( 图22.1) 。颗粒中绝 大多数为核心蛋白质，但也有其它蛋白质少量存在，蛋白质的种类 20 种左右。每个核 6 8 中，与 10 个分子的 hnRNP 相比，这些蛋白质的拷贝数约有 10 。hnRNP 的精确结构和 RNA 以这种形式存在的作用还有待进一步探讨。 图22.1 hnRNA 是由许多小珠状结构形成的核蛋 图22.2 细胞核中，RNA 的加工包括 3和 5 白颗粒。 修饰以及内含子的去除等。剪接需要在内含子 与外显子结合处产生断裂，然后将外显子末端 相连。从图中的放大演示可以看到RNA 加工的 基本流程，但这并不代表实 行为的发生顺序。 成熟的mRNA 通过核孔被运到胞质中去， 细 胞质中完成翻译。 1 PDF created with FinePrint pdfFactory Pro trial version 剪接发生 核内，与其它一些修饰同时进行，以产生新合成的RNA 。一个割裂基因的 表达过程如图22.2 所示。转录物 完成5端加帽(见第5 章)，内含子的去除(本章) ，3端加 多聚腺嘌呤尾巴(本章)后，通过核孔进入胞质进行翻译。 关于发生 核内的各种反应过程，和其它 RNA 修饰相比，我们应该知道剪接发生的 位点。剪接是否发生 一个特殊位点，是否与核质转运等其他事件相关？如果不发生剪接， 非割裂基因的表达过程是否会出现很大差异？ 对于剪接反应本身来说，一个最主要的问题是如何保证它的准确性。是什么确保了每 个内含子末端可以被准确的识别，并把正确的序列从 RNA 中剪接掉？从前体中切除内含 子的过程是否是按照特定的顺序进行？成熟 RNA 是通过有效前体间的识别，还是通过改 变剪接机制来调控基因表达的？ 我们把剪