蛋白质的分选.pptVIP

1.COPII有被小泡 功能：介导胞内顺向运输(anterograde transport)，负责从内质网到高尔基体的物质运输。 COPII包被蛋白构成：5种蛋白质亚基，属可溶性蛋白。 Sec23p/Sec24p复合体，Sec13p/Sec31p复合体； Sar1p（GTP结合蛋白，分子开关）。 COPII有被小泡组装、出芽调控 2.COPI有被小泡 功能：介导细胞内逆向运输(retrograde transport)，负责从高尔基体膜泡间、CGN到内质网的物质运输。 回收再循环的膜脂双层、v-SNAREs(vesicle membrane SNAP receptor)和内质网逃逸蛋白(escaped proteins)，返回内质网。 COPI包被的构成：含7种蛋白亚基和1种ARF蛋白。 其中，ARF蛋白：GTP结合蛋白，类似Sar1p，调控COPI包被蛋白复合物和网格蛋白有被小泡组装与去组装。 COP I 衣被小泡 3.网格蛋白有被小泡介导多条转运途径： 高尔基体TGN(网格蛋白有被小泡发源地)→胞内体、质膜、溶酶体、植物液泡； 质膜→细胞质、胞内体(胞吞)； 胞内体→溶酶体。 接合素蛋白 受体 网格蛋白 有被小泡 转运泡 ARF1亚基 0.2μm Clathrin coated vesicles 笼形蛋白衣被小泡 衣被类型 GTP结合蛋白 组成与衔接蛋白 运输方向 clathrin ARF Clathrin重链与轻链，AP2 质膜→内体 Clathrin重链与轻链，AP1 高尔基体→内体 Clathrin重链与轻链，AP3 高尔基体→溶酶体，植物液泡 COP I ARF COPαββ’γδεζ 高尔基体→内质网 COP II Sar 1 Sec23/Sec24复合体，Sec 13/31复合体，Sec 16 内质网→高尔基体 内膜系统细胞器保持其特异性蛋白组成的两种机制（保留和回收）： （1）膜泡将驻留蛋白(大复合物)排斥在外，防止出芽转运。 （2）识别驻留蛋白逃逸的回收机制。 例，内质网腔驻留蛋白(蛋白二硫键异构酶、ER腔内分子伴侣)典型C端回收信号(retrieval signals)：Lys-Asp-Glu-Leu(KDEL)，以COPI有被小泡捕获逃逸蛋白返回。 KDEL序列特异性受体定位：TGN、COPII和COPI膜。 KDEL序列受体特点：pH敏感，保证了KDEL蛋白在高尔基体结合，内质网分离。 内质网膜蛋白(如SRP受体)C端回收信号：Lys-Lys-X-X（KKXX）。 供体膜与靶膜之间膜泡的转运、锚定与融合模式： 膜泡形成、转运及与靶膜融合为特异性过程，有高度选择性，涉及多种蛋白识别、组装、去组装复杂调控。 内膜系统各结构保持形态与膜成分相对稳定的方法: 内质网驻留蛋白具有回收信号，会将其保留或回收，被比喻成“开放的监狱”(open prison)。 高尔基体聚集在微管组织中心(MTOC)附近，并在高尔基体膜囊上结合有类似动力蛋白的蛋白质，从而使其靠近MTOC，并维持其极性。 同样，溶酶体、分泌泡和细胞质膜及胞内体等，也都具有各自特异的成分，都可通过特异性的膜泡出芽、转运和融合保证流动与稳定的平衡。 蛋白质的定向转运（protein targeting）或分选（protein sorting）：结构与功能各异的蛋白质，在细胞质基质或糙面内质网的核糖体上合成，然后转运到正确的部位，并组装成结构与功能的复合体，参于生命活动的过程。 广义的过程包括：蛋白质从合成直到降解或分泌胞外。 细胞内合成的蛋白质、脂类等物质之所以能够定向的转运到特定的细胞器，取决于两个方面。 信号序列 （signal sequeence） 蛋白质中包含特殊的信号序列。 识别装置（分选受体） （sorting receptor） 细胞器上具特定的信号识别装置。 一.信号假说与蛋白质分选信号 二.蛋白质分选基本途径与类型 三.膜泡运输 1.信号肽的发现与信号假说的提出 2.信号肽的序列特点 3.信号识别相关因子：信号识别颗粒、停泊蛋白和移位子 4.信号假说的实验验证及rER蛋白质合成过程确定 信号肽(signal peptide)的发现： 1972年Milstein等用骨髓瘤细胞提取的免疫球蛋白较分泌到胞外的成熟免疫球蛋白在N端多出一段肽链，推测起信号作用。 信号假说（Signal hypothesis）：分泌蛋白合成与定位 1975年美国G. Blobel和D. Sabatini正式提出。