一种新的肝再生刺激因子--HPPCn的克隆表达、分离纯化及其生物学活性的研究.pdf

中文摘要 因同源性达92％，蛋白同源性达94％，在此我们将该基因编码的蛋白命名为 HPPCn。为了使人源基因HPPCn在原核表达工程菌中获得高效表达，我们用大 引物PCR的方法将HPPCn序列中不易于原核表达的位点进行定点诱变，并将诱 转化表达工程菌，EcoliBL21(DE3)的感受态细胞。利用该工程菌，先后在摇 瓶和发酵罐条件下诱导表达重组蛋白。获得的菌体总蛋白，利用亲和层析、离子 交换层析、凝胶过滤等手段进行纯化，得到的纯品蛋白经HPLC检测纯度达到 94．2％。对重组蛋白进行活性测定，发现所得重组HPPCn蛋白能够明显促进 迁移也表现出一定的促进作用。此外，我们建立了小鼠部分肝切除模型，借以检 测重组HPPCn蛋白的体内活性。结果表明，HPPCB在体内促进肝损伤再生方面 表现出非常显著的作用。 5 英文摘要 Molecular andPurificationof cloning，Expression，Separation Researchonits Cn(HPPCn)andBioactivity． Hepatopoietinprotein Abstract is mammalian mammal’s oftissue limited。the Although capacity regeneration of normal liver aremarkable eircumstances， regeneration．Under possesses capacity within3 andreachedits size thehumanliverinitiates days originalby regeneration levelwithin3-6 most functionisrestoredtoalmostnormal 3-6months．Incases．1iver ofliver moleenlarmechanism weeksafterPartial regeneration Hepateetomy(PH)．The several concernedresearchersinlast is oneofhot was bymany always areas，which 1．2hundredmillion viral decades．Thereareabout hepatitis，