藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞增殖和凋亡的影响及-中国中药杂志.pdfVIP

第３３卷第１５期 　　　 中国 中药杂 志 Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１５ ２００８年８月 　　　　　　　　　ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ　　　　　　　 Ａｕｇｕｓｔ，２００８ 藏花素对膀胱移行细胞癌Ｔ２４细胞增殖和凋亡的 影响及作用机制研究 １ １ ２ １ １ １ 赵　培 ，罗春丽 ，吴小候 ，胡宏波 ，吕纯芳 ，冀慧莹 （１．重庆医科大学 医学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室，重庆４０００１６； ２．重庆医科大学 附属第一医院泌尿科，重庆４０００１６） ［摘要］　目的：研究藏花素（ｃｒｏｃｉｎ）对膀胱移行细胞癌（ＴＣＣＢ）增殖、凋亡的影响及作用机制。方法：用ｃｒｏｃｉｎ 处理后，四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法分析其对Ｔ２４细胞增殖的影响；流式细胞术检测Ｔ２４细胞周期动力学和凋亡诱 －１ 导率。建立人膀胱癌Ｔ２４细胞株裸鼠移植瘤动物模型。随机分为对照组和处理组。５０ｍｍｏｌ·Ｌ ｃｒｏｃｉｎ处理后， 观察其对肿瘤的抑制作用；电镜观察肿瘤组织形态改变；ＳＰ免疫组织化学法分析Ｂｃｌ２，Ｂａｘ，ｓｕｒｖｉｖｉｎ，ＣｙｃｌｉｎＤ蛋白 １ 表达。结果：Ｃｒｏｃｉｎ能明显抑制人膀胱癌Ｔ２４细胞的生长，并使Ｔ２４细胞呈明显的Ｇ／Ｇ期阻滞现象；Ｔ２４细胞早 ０ １ 期凋亡率随ｃｒｏｃｉｎ作用时间的延长而逐渐增加。Ｃｒｏｃｉｎ对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用，电镜观察可 见细胞凋亡的形态学改变，免疫组化结果显示，经Ｃｒｏｃｉｎ处理后Ｂｃｌ２，ｓｕｒｖｉｖｉｎ，ＣｙｃｌｉｎＤ的表达下调，而Ｂａｘ的表 １ 达上调。结论：Ｃｒｏｃｉｎ对人膀胱癌Ｔ２４细胞株的体内外增殖均具有良好的抑制作用，其机制可能是改变细胞周期分 布和诱导细胞凋亡，作用机制与下调Ｂｃｌ２，ｓｕｒｖｉｖｉｎ，ＣｙｃｌｉｎＤ基因表达和上调Ｂａｘ的基因表达有关。 １ ［关键词］　藏花素；膀胱癌；细胞凋亡；细胞周期 ［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）１５１８６９０５ 　　膀胱移行细胞癌（ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎａｌｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａｏｆ １．２　细胞培养　人膀胱移行细胞癌Ｔ２４细胞（以 ｂｌａｄｄｅｒ，ＴＣＣＢ）是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，目 下称Ｔ２４细胞）购自重庆医科大学病毒性肝炎研究 前国内外的治疗方法主要为肿瘤手术切除结合膀胱 所，于３７℃，５％ＣＯ恒温培养箱中培养，待细胞长 ２ 内化疗药物灌注。由于化疗药毒副作用大，靶向性 至瓶底８０％～９０％时用０２５％的胰酶将贴壁生长 差，易出现多药耐药，因此，寻找高效低毒的天然中 的细胞用直接吹打法传代。 草药，并揭示其抗癌机制成为近年来研究的热点。 １．３　药物与试剂　藏花素分子式 Ｃ Ｈ Ｏ ，相对 ４４ ６４ ２４ 研究表明，中药藏花素（ｃｒｏｃｉｎ）具有广谱抗癌活性， 分子质量 ９７７．２１，为水溶性橙黄色粉末，纯度 ＞ 对白血病、卵巢癌、结肠癌、横纹肌肉瘤和软组织肉 ９９％（Ｓｉｇｍａ公司