血糖的测定-陕师大-运动与健康试验教学中心-陕西师范大学.pptVIP

实验六 血糖的测定与应用  (葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法) 掌握葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖含量的原理和方法； 了解运动训练中血糖的变化。 葡萄糖能被葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢，后者与苯酚及4-氨基安替比林在过氧化物酶的作用下产生红色酸类化合物，其颜色深浅与葡萄糖浓度成正比。 三、试剂 用蒸馏水将1%苯酚稀释至0.1%。 酶酚混合液的制备：将0.1%苯酚溶液与等量的酶制剂混合。 取3支大试管，编号，按下表操作： 计算公式： 本法对葡萄糖有特异性，不受其他糖存在的影响，异可用于尿糖测定。 本法标本用量小，取样时力求准确。 由于糖酵解仍可在全血中以每小时7%的速率进行，所以应在取样后30min内分离血清，且应避免溶血，防止RBC中葡萄糖-6-磷酸溶入血清，影响结果。 分离后的血清样本在2~8℃ 可保存24h，-20 ℃下可存1个月。 正常人空腹血糖浓度为4.4~4.6mmol/L（80~120mg%），低于3.8mmol/L称低血糖。运动员安静时与普通人血糖正常值无差异，运动时会随运动强度和持续时间出现变化。 短时间剧烈运动时，主要依靠肌糖原分解供能，血糖供能少，血糖值变化不大；长时间运动时骨骼肌吸收利用血糖的过程加强、速度加快，血糖下降。 因此可根据血糖的变化，及时补糖，维持血糖平衡有利于推迟运动性疲劳的发生。 运动生物化学实验课件 陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 一、 实验目的 二、实验原理 葡萄糖标准贮存液（10mg=1mL）：精确称取无水葡萄糖1 g，用12mmol/L苯甲酸溶液溶解，移至100ml容量瓶中，再以12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，摇匀，移入棕色瓶中，冰箱内保存。 葡萄糖标准应用液（ 1mL=10mg ）：吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml，置于100ml容量瓶中，再以12mmol/L甲苯酸溶液稀释至刻度。 酶制剂（市售药盒）。 1%苯酚溶液。 四、实验操作 3.0 3.0 3.0 酶酚混合液 — 0.02 — 葡萄糖标准应用液 — — 0.02 血清 空白管 标准管 测定管 加入物（mL） 混匀，置沸水浴中煮沸12分钟，取出置流水中冷却5分钟用分光光度计630nm，以空白调零，读取各管吸光度。 血糖测定 OD测 葡萄糖（mmol/L） = ---------------- × 5.55 OD标 五、实验结果 六、注意事项 七、指标应用 运动生物化学实验课件 陕西师范大学体育学院实验教学示范中心