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PAGE PAGE 5 生物化学实验试题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析；3、透析；4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳；5、蛋白质变性；6、复性；7、Tm 值；8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性； 11、退火； 12、增色效应 13、盐析和盐溶 14、电泳 15、层析（色谱） 16、酶的活力单位 17、比活力 18、分子筛效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键？（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的？ （ ） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（ ） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、?-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收？（ ） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收？（ ） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（ ） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查？ （ ） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（ ） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（ ） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用? D、沉淀作用? 10、有关变性的错误描述为（ ） A、蛋白质变性后，其一级结构和空间结构改变 B、蛋白质变性后，其理化性质和生物学活性改变C、加热、紫外线照射、超声波等可以引起蛋白质变性D、变性蛋白质粘度增加，易被酶水解，易沉淀 11、双链DNA热变性后（ ） A、黏度下降 B、沉降系数下降 C、浮力密度下降 D、紫外吸收下降 12、酶的活化和去活化循环中，酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上？（ ） A、天冬氨酸 B、脯氨酸 C、赖氨酸 D、丝氨酸 13、在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体？（ ） A、His的咪唑基 B、Arg的胍基 C、Cys的巯基 D、Trp的吲哚基 三、填空 1、脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（ ）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产生（ ）色的物质。 2、通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（ ）、（ ）、（ ）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。 3、移液枪在每次实验后应将刻度调至（ ），让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命，并严禁吸取（ ）。 4、使用离心机时，如有噪音或机身振动时，应立即（ ），并且离心管须对称放入套管中，防止机身振动，若只有一支样品管，则另外一支要用（ ）代替。 5、测定蛋白质浓度的方法主要有（ ）、（ ）、（ ）。 6、利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有（ ）和（ ）等。 7、核酸在260nm附近有强吸收，这是由于（ ）。 8、双键DNA热变性后，或在pH2以下，或在pH12以上时，其OD260（ ），同样条件下，单键DNA的OD260（ ）。 9、硝酸纤维素膜可结合（ ）链核酸。将RNA变性后转移到硝酸纤维素膜上再进行杂交，称（ ）印迹法。 10、常用二苯胺法测定（ ）含量，用苔黑酚法测定（ ）含量。 11、变性DNA的复性与许多因素有关，包括（ ）、（ ）、（ ）、（ ）、（ ）。 12、温度对酶活力影响有以下两方面：一方面（ ），另一方面（ ）。 13、维生素C是（ ）酶的辅酶，另外还具有（ ）作用。 14、在分光光度计的使用或检定中，（ ）的准确度是衡量仪器工作性能的一项重要指标，它的准确程度直接关系到所测数据的可信性及科学性。（ ）的误差越大，测试结果的可信性越差，从而影响到测试数据的准确性。 四、问答 1、紫外分光光度法测定核酸