三叶青冻干粉抗炎作用实验探究.docx

三叶青冻干粉抗炎作用实验探究 ［摘要］目的探讨三叶青冻干粉的抗炎作用。方 法设三叶青冻干粉三个剂量组，另设阳性对照和溶剂对照 组，采用经口给药方式，给药后观察三叶青冻干粉对二甲苯 致小鼠耳廓肿胀的抑制作用、对小鼠毛细血管通透性的影响 以及对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的抑制作用。结果三叶青 冻干粉在7. 16 g/kg和3. 58 g/kg剂量下能有效抑制二甲苯 致小鼠耳肿胀作用；7.16 g/kg对醋酸引起的小鼠腹腔毛细 血管的通透性有抑制作用；在5. 0 g/kg和2. 5 g/kg剂量下 能显著抑制由角叉菜胶所致的大鼠足跖肿胀。结论三叶青 冻干粉有显著的抗炎活性。 ［关键词］三叶青；冻干粉；抗炎作用 ［中图分类号］R285 ［文献标识码］A ［文章编号］ 1673-9701 (2013) 30-0013-02 三叶青(radix tetrastigmae)为葡萄科植物三叶爬藤 (Tetrastigmahemsleyanum Dielset Gilg)的干燥块根， 是浙江地道药材之一［1］,以块根或全草入药［8］,具有清热 解毒、祛风化痰、活血止痛的功能［2］。近来关于三叶青的 研究较多，但多集中在抗肿瘤方面［3?5, 9］,对于三叶青 抗炎方面研究较少，而且多采用的是三叶青提取物，在提取 过程中，大多需要加热等过程，造成成分损失［2］,因而不 能很好显示其真正效果。基于此，本文在2012年5?10月 采用最大限度保留其有效成分的三叶青冻干粉来进行研究， 以期较为全面地观察三叶青的抗炎作用，为以后进一步研究 提供基础。 1材料与方法 1. 1试验材料 1. 1. 1受试物与试剂 三叶青冻干粉白色粉未，由杭州 天惠医药科技有限公司提供；二甲苯（批号, 成都市科龙化工试剂厂；伊文思蓝（批号,瑞 士 Fluka公司进口分装；角叉菜胶，Sigma公司进口分装， 25 g/瓶。 1. 1.2实验动物ICR小鼠，SPF级，体重18?22 g,雌 性50只，合格证号：2008001619934；雄性50只，合格证 号：2008 001620192c大鼠，体重170?200 g,雌性50只， 合格证号：2008001624785c以上均由上海斯莱克实验动物 有限公司提供，饲养在屏障环境中，自由进食饮水，试验前 适应5 do 1. 2试验方法 1.2.1三叶青冻干粉对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制 作用 取雌性ICR小鼠50只，随机分为5组，即水对照组（30 mL/kg）、11引噪美辛对照组（15 mg/kg）、三叶青冻干粉高剂 量组（7.16g/kg,相当于新鲜药材46.44 g/kg）.三叶青冻 干粉中剂量组（3.58 g/kg,相当于新鲜药材23. 22 g/kg）. 三叶青冻干粉低剂量组（1.79g/kg,相当于新鲜药材11.61 g/kg）o各组动物连续给相应受试物3 d,末次给药后30 min, 小鼠右耳廓内外用二甲苯均匀涂抹，用量0. 1 mL,以引起炎 症反应，左耳不加处理作为自身对照。致炎后lh将小鼠脱 颈椎处死，用打孔器（直径9 mm）,将左右耳片分别敲下后 称重，每只动物右、左耳片重量差即反映炎症肿胀程度。 1.2.2三叶青冻干粉对小鼠毛细血管通透性的影响 取 雄性ICR小鼠50只，随机分为5组，分组情况同上。各组 动物连续给相应受试物3 d,末次给药后30 min,小鼠尾静 脉注射0. 5%依文思蓝0. 1 mL/kg,并立即注射0. 6%醋酸0. 2 mL/只，30 min后将小鼠脱颈稚处死，剪开腹腔，用5 mL生 理盐水冲洗腹腔2次，合并冲洗液，以3 000 rpm离心10 min, 取上清液于721型分光光度计590 nm处比色，测定其0D值。 1.2.3三叶青冻干粉对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的抑 制作用 取雌性SD大鼠50只，体重170?200 g,随机分为 5组，即水对照组（30 mL/kg）、强的松组（5. 4mg/kg）、三 叶青冻干粉高剂量组（5.0 g/kg,相当于新鲜药材32.4 g/kg）、三叶青冻干粉中剂量组（2.5 g/kg,相当于新鲜药 材16.2 g/kg）.三叶青冻干粉低剂量组（1.25 g/kg,相当 于新鲜药材8. 1 g/kg）o各组大鼠连续给相应受试物5 d, 于注射前先测定大鼠右后足跖的厚度，末次给药后1 h,给 各组大鼠右后足跖皮下注射1%角叉菜胶0. 1 mL以致炎，分 别测量致炎后1、2、4、6、24 h右后足跖的厚度(mm),以 大鼠致炎后足跖厚度与致炎前足跖厚度差表示炎性肿胀程 度。 1. 2. 4数据分析本实验数据用(x±s)表示，多组间 均数比较采用方差分析，当总体方差有统计学意义(P 3讨论 三叶青是较新的中药材，历代本草未见［1