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专题报告二： 痰涂片萋-尼氏抗酸染色直接镜检结核杆菌结果回顾性分析 无锡市蠡湖社区卫生服务中心 唐晚若 1. 前言： 世界卫生组织 2009年全球结核病控制报告显示，全球现有 1370万结核病患者, 每年发病人数为927万，国发病人数居世界第二位，是 22 个结核病高负担国家之一[1]。自 1997年卫生部将肺结核疫情列为法定乙类传染病报告以来，结核病的发病路逐年攀升。经过十数年结核病的防治工作，结核发病率得到了有效控制。无锡市滨湖区2004-2009年统计结果显示，结核病发病率呈现了下降的趋势[2]。 2. 现状： 实验室检查对结核病的诊断和治疗发挥了重要的作用。长期以来，结核病的实验室诊断是结核病防治的重点和难点。而结核病的早期诊断和有效治疗是控制结核病疫情的关键。因此, 准确、快捷、简便的实验室检测方法对于结核病的早期诊断和及时治疗具有十分重要的意义。近十余年来，结核病实验室诊断技术突飞猛进，其中一些技术已经过临床验证并获得一些权威机构的认证[3]，然而，我国多数地区的结核病实验室诊断仍依赖痰涂片镜检、痰结核菌培养及 PPD皮试等传统方法。尤其在基层医疗单位中，由于条件、设备的限制，尚不能进行 PCR检查、高速离心沉淀集菌等，而培养法又因时间太长，不能满足临床需要，而痰涂片萋-尼氏抗酸染色涂片镜检不仅可以明确结核传染源，而且十分经济，具有简便、快捷、低廉的优点。 3. 问题确立： 萋-尼氏抗酸染色涂片镜检敏感性低，灵敏度仅40%~60%，且方法繁琐，假阳性和假阴性较高。如何提高抗菌杆菌阳性检出率, 对基层医院检验科来说是极为重要的。 4. 目的： 根据我院自2009年以来的160名患者，410例痰液标本检测结果进行分析、探讨, 以更好的提高痰涂片检出率。 5. 文献查证： 目前，结核病的细菌学实验诊断，主要依靠痰液涂片镜检抗酸杆菌。由于该方法阳性率不高， 发展中国家此法的敏感性仅为20％～40％，发达国家达40％～60％[4]。罗氏培养，耗时是活菌才能生长，整个过程长达8～12周，不适合现代短程化疗的需要，但仍可继续做药物敏感性试验、菌种鉴定和毒力试验[5]。在确诊的MTB患者中FQ-PCR的阳性检出率可达58％， 明显高于培养法与涂片法，无论敏感性还是特异性，FQ-PCR法较涂片和培养法都有优势[6]。此外dot-ELISA[7]、基因芯片[8]、免疫胶体金[9]等技术也不断应用于结核杆菌的临床检验。但是在基层医疗单位中，由于条件、设备的限制，痰涂片萋-尼氏抗酸染色涂片镜检仍是结核杆菌检测的最主要手段。 6. 解决方法： 回顾性分析本科室萋-尼氏抗酸染色涂片镜检结果，统计分析结果及影响因素。 7. 执行过程： 7.1 标本来源： 本院 2009年门诊及病房送检的肺结核病人痰液。 7.2 痰标本的采集： 分为即时痰，夜间痰，清晨痰。指导病人咳痰前先用清水漱口，深呼吸后，由肺部深处咳出的分泌物，一般收集12-24h痰液，分三次收集，每次3-5ml，用国际通用腊纸盒，可密封塑料盒或螺旋盖痰瓶收集痰标本，涂片时分别挑取脓性或干酪样痰液0.1ml，均匀地涂成 10mm×20mm大小的痰膜。 7.3 检测方法： 痰菌检查采用直接厚涂片法，用萋那氏染色法。经镜下观察100~300个视野，按标准报告阴性或阳性结果。 7.4 统计分析： 采用SPSS13.0统计软件包处理数据。 8. 结果评价： 回顾性分析了160位门诊患者，410份痰液标本。男性患者105名（65.6%），女性55（34.4%），患者年龄最大80岁，最小19岁，其中30岁31人(19.4%)，30~60岁70人(43.8%)，60岁59人(36.8%)。410份标本中干酪样痰31份(7.6%)，血痰5份(1.2%)，粘液痰211份(51.5%)，唾液痰163份(39.8%)，标本合格率60.2%。阳性标本56份(11.2%)，阴性标本364(88.8%)，患者阳性19人，阳性率为12.4%。 对同一患者多分痰检结果分析发现，检测结果重复率为96.87%，五位患者检测结果存在差异。对影响检出率的因素进行卡方检验，结果显示性别、年龄与阳性检测无相关性，p值分别为0.684、0.976，标本性状与检出阳性率具有相关性（p=0.001）。回顾五位检测结果结果差异的患者标本发现，均存在1至2份不合格标本，与统计结果一致。 9. 结论： 世界卫生组织(WHO)在全球结核病规划(GTB)中明确提出：现代结核病控制策略(DOTS)的5个组成部分中, 痰涂片镜检发现结核病是首要的, 痰涂片抗酸染色找抗酸杆菌是世界卫生组织和国际防痨及肺部疾病联合会针对低收入且结核病疫情严重的发展中国家所制定的技术指南, 是相应国家开展结核病控制项目时唯一符合成本效益原则的细菌学实验技术, 由于其技术