蛋白芯片飞行质谱系统使用须知.doc

生物质谱平台使用须知 1. 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（Ultraflex III? MALDI TOF /TOF） MALDI-TOF-MS)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱。适用于混合物及生物大分子的测定。MALDI-TOF-MS具有灵敏度高、准确度高及分辨率高等特点，为生命科学等领域提供了一种强有力的分析测试手段。该平台是新一代标准模块化飞行时间质谱仪，具有smartbeam?激光技术，配有MALDI离子源、线性和反射操作模式、源后裂解（PSD）串联质谱和高能量碰撞诱导解离 (CID)。 主要用途： 结合磁珠即液体芯片用于从复杂体液发现潜在的生物标志物 蛋白质样品分子量测定 肽质量指纹图谱（Peptide Mass Fingerprinting, PMF）分析 多肽序列测定 蛋白质的磷酸化、糖基化等翻译后修饰分析 寡核苷酸多态性分析 2. 液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱仪（micrOTOFQ II LC/MS QTOF） micrOTOFQ II 属于四级杆-飞行时间串联质谱（Q-TOF MS）类质谱。其主要组成部分包括电喷雾离子漏斗源、四级杆、TOF质量分析器、注射泵和数据采集与处理部分。该质谱与液相色谱联用自动进样，适合于多肽的分离、检测与测序，可应用在大规模药物开发、蛋白质组学等新兴技术领域。 主要用途： 蛋白质样品分子量测定 精确质量测定及元素组成分析 肽质量指纹谱 多肽序列测定 蛋白质的磷酸化、糖基化等翻译后修饰分析 与二维液相相联，可进行多肽的分离、检测与测序 MALDI-TOF-TOF质谱检测项目及收费标准（试运行） ? 院内 院外 分子量测定 150元/样本 300元/样本 肽质量指纹图谱（含酶切） 400元/样本 800元/样本 MS/MS蛋白鉴定 600元/样本 1200元/样本 液体芯片生物标志物分析 800元/样本 1200元/样本 普通酶切 100元/样本 150元/样本 胶内酶切 150元/样本 200元/样本 De novo 测序 根据实际情况价格面议 LC Q-TOF质谱检测项目及收费标准 （试运行） ? 院内 院外 分子量测定 150元/样本 300元/样本 LC－MS/MS鉴定蛋白质 （胶内酶解产物） 750元/样本 1500元/样本 LC－MS/MS鉴定蛋白质 （复杂样本） 根据复杂程度价格面议 送样须知： 蛋白样品鉴定： 样品量：50pmol干粉或1ug/uL以上（一般测试） 100pmol干粉或1ug/uL以上（MALDI串联质谱分析） 盐含量：挥发性无机盐20mM，请勿使用PBS、SDS和尿素等质谱干扰物质； 银染过程中不得使用戊二醛作为固定剂； 电泳过程中，请操作者戴口罩、帽子、无粉手套，以防止角蛋白污染； 送样时，请提供样品信息，包括样品名称、胶图、分子量大小、种属等。 生物标志物分析： 适于分析各种体液(血液、尿液、胃液、前列腺液及乳头分泌液等)及蛋白提取液，蛋白提取液应统一进行蛋白定量。 统一规范取样过程，血清样本的收集和保存方法如下： 使用BD真空抽血管（不抗凝）清晨空腹抽血2-5ml，半小时内放入4℃冰箱保存，4℃3000转离心5分钟。取上清加入eppendorf管。再次3000转离心5分钟，0.5ml eppendorf管分装，20μl/管，放入-80℃ 血清样本在离体4小时内，应完成离心、分装等过程，并放入-80℃保存。期间所有操作均在4℃以下进行，所有样本 注：样本不能有溶血，不能将下层的细胞吸入，不能吸入上层油脂;操作时不要戴有粉乳胶手套，以免滑石粉干扰对样品的检测 样本应标记清楚，材料齐全 实验耗材的统一 为保证样品的质量及条件的统一，对耗材要求如下： Pipet Tips(Axygen公司) eppendorf 管 (Axygen公司) BD真空抽血管（不抗凝）(BD公司) 每周一至周五,请提前1-2周预约. 北京大学临床肿瘤学院 生物质谱平台使用申请单 仪器名称：（请在所用仪器括号内打√） 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪 （ ） 液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱仪 （ ） 蛋白质芯片-飞行时间质谱仪 （ ） 申请单位及科室： 研究课题： 基金资助： 课题负责人 送检人： 样品总数： 付款方式： 联系方式（地址、邮编及电话）： 申请人签字： 课题负责人签字： 中心实验室负责人签字： 年 月