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中国恒河猴SIVmac239艾滋病模型亚急性期实验观察 ［摘要］目的：观察SIVmac239中国恒河猴艾滋病 模型亚急性期内T淋巴细胞亚群、病毒载量指标变化情况， 探讨中国恒河猴艾滋病模型亚急性期病毒学相关指标变化 特征。方法：采用SIVmac239病毒株静脉接种健康中国恒河 猴复制中国恒河猴艾滋病动物模型，观察猴免疫缺陷病毒 (simian immunodeficiency virus, SIV)感染后动物模 型亚急性期内T淋巴细胞亚群指标变化、病毒载量变化情况。 同时记录动物模型临床症状情况。结果：健康恒河猴接种病 毒株后3个月体重及BMI指数比较稳定，各时间点差异不显 著，在感染第10?14天病毒载量达到高峰(6.72±0.44) 个lg,此后整体表现为水平波动下降趋势。T淋巴细胞亚群 在感染后出现显著改变，CD3, CD4, CD8计数和百分比有不 同程度的变化；CD4/CD8比值感染后2周内明显下降，一般 在病毒载量高峰时表现为最低比值为(0. 86±0.29),随后 比值缓慢波动上升。感染3个月内共有3只感染猴临床症状 明显，其中1只出现腹泻、2只出现摄食下降等临床症状。 结论：中国恒河猴艾滋病动物模型与国外印度恒河猴艾滋病 动物模型亚急性期相似，研究内容为中国恒河猴应用于艾滋 病模型研究的标准化建立补充了更详尽的亚急性期变化内 容。 ［关键词］艾滋病；亚急性期；恒河猴；SIV 艾滋病(acquired immune deficiency syndrome, AIDS) 是因机体感染人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)导致全身免疫系统毁灭性打击所出现的获得性 免疫缺陷综合症［1-2］ o恒河猴的基因序列、血液生化指标 等与人相近［3-6］,感染猴免疫缺陷病毒(simian immunodeficiency virus, SIV)病毒后发病机制、过程、 临床症状表现与人艾滋病相似［7-9］,可在感染病毒后出现 免疫体系的损害和多系统多器官组织的病变，所以猴艾滋病 模型成为艾滋病研究的一个金标准，并为WHO所推荐［10］ o 国外恒河猴猴艾滋病模型多采用印度恒河猴建立。中国恒河 猴应用于艾滋病模型在国内虽然较为常见，但对感染亚急性 期模型的研究结果报道较少，而且并不详细，这对中国恒河 猴应用于艾滋病模型研究的标准化建立带来了亚急性期研 究内容的缺失。本研究针对SIVmac239感染中国恒河猴亚急 性期3个月内各监测指标进行了较为深入的研究。 1材料与方法 1. 1动物 试验研究对象为15头中国恒河猴，雄性，体 重4. 5?6. 5 kg, 3?5岁，平均年龄为(3. 91±0. 67)岁。 外观健康，体检无浅表淋巴结肿大，经检测结核菌素试验阴 性和胸部X光片正常，痢疾菌阴性，血清学SIV、猴逆转录 D病型毒（SRV）、猴B病毒（BV）、猴T淋巴细胞I型病毒 （STLV-I）抗体阴性。试验动物购自广东省灵长类动物实验 中心。实验动物合格证明证号SCXK （粤）2009-0025o 1.2实验环境本研究在广东省长类动物实验中心进 行，实验场地为生物安全2级实验室，动物实验设施检验编 号C2009022o动物单笼饲养在不锈钢笼具中，每天投3次饲 料，自由饮水。室温20?25 °C,相对湿度50%?70%。 1.3实验动物医学伦理本实验经广东省长类动物实验 中心动物伦理委员会批准（文件编号K09004-IACUC）,实验 严格按照广东省长类动物实验中心标准操作/作业流程执 行，并按照K09004-IACUC文件中内容给予相应的动物福利。 1.4主要试剂与仪器 血常规采用HORIBA ABX PENTRA 60 全自动血细胞分析仪分析（由高要市康达公司检测）；外周 血T淋巴细胞亚群检测采用美国ED公司的FACSCalibur型 流式细胞仪，检测用荧光标记单克隆抗体CD3-别藻蓝蛋白 （APC）, CD4-多甲藻叶绿素蛋白（PerCP）, CD8-藻红蛋白 （PE）均购自美国BD公司；SIV RNA抽提采用一管式体液 病毒核酸抽提试剂［11］逆转录酶、RNA酶抑制剂、探针法荧 光定量PCR试剂盒均购自立陶宛Fermentas公司；荧光定 量PCR检测采用ABI-7300 PCR仪（美国生物系统公司）测 定。 1.5中国恒河猴艾滋病模型 模型建立参照文献进行复 制[12-13] o SIVmac239病毒株，由中国科学院昆明动物研究 所郑永唐博士馈赠，广州中医药大学热带医学研究所保存。 病毒滴度为5.0X105组织半数感染量(TCID50) /mL,动物 以氯胺酮7 mg?kg-1麻醉后以5MID100 (100%感染剂量)经 静脉注射1 mL感染动物。感染后2周，以血浆病毒分离