原生质体培养 植物组织培养是进行植物转基因的重要步骤 (一)细胞融合(cell fusion)与细胞杂交技术 通过培养和介导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合或细胞杂交。 同核融合细胞:相同基因型的细胞融合而成。 异核融合细胞:不同基因型的细胞融合而成。 自发融合:同种细胞在培养过程中自发合并的现象。 诱发融合:异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合。 诱导细胞融合的方法:生物方法(仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒 )、化学方法(聚乙二醇PEG)、物理方法(电击和激光)。 二、细胞工程 (二)单克隆抗体技术 (三)细胞拆合与显微操作技术 细胞拆合:把核与质分离开来,然后把不同来源的细胞质 和细胞核相互配合,形成核质杂交细胞。 ? 物理法结合显微操作技术:用机械方法或激光把细胞核去 掉或使之失活,然后用微吸管吸取其它细胞核,注入去核 的细胞质中,组成新的杂交细胞。 ? 化学法结合离心技术:用松驰素B处理细胞,离心,将细胞 拆分为核体(karyoplast)和胞质体cytoplast)。在PEG 或仙台病毒介导下,核体与另一胞质体融合,形成重组细胞。 体细胞---绿色荧光蛋白水母基因---取核---未受精卵 图为:美国密苏里大学最近通过克隆技术培育出四只含有荧光水母基因的小猪。左为荧光小猪,右为正常小猪
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