工业酒精发酵污染菌的分离及新型抑菌剂的应用-食品与发酵工业.PDF

蟹翟囡瞄霉幽■!!塑!!!些!坚型!型!!!!型竺!!!I DOI：10．13995／j．cnki．11—1802／ts．014343 工业酒精发酵污染菌的分离及新型抑菌剂的应用 刘颖1，陈雄1，廖蓓2，李志军2，王志h 1(湖北工业大学，发酵工程教育部重点实验室，湖北省工业发酵协同创新中心，湖北省工业微生物重点实验室，武汉，430068) 2(安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌，443000) 摘 要 为了研究新型抑菌剂在酒精发酵染菌控制中的应用，从工业酒精发酵污染液分离出主要污染菌HG一 201，其16SrDNA与Pantoea 加新型抑菌剂葡萄糖氧化酶和溶菌酶，以确定对菌株HG-201的抑菌效果。将酿酒酵母与菌株HG-201以1：30 U／mL的葡萄糖氧化酶和0．25g／ 的接种比例进行混合培养，并在发酵开始添加低浓度的抑菌剂。结果表明：10 L的溶菌酶即可完全抑制菌株HG一201的生长和代谢，并且在实验条件下对酿酒酵母生长以及乙醇的产量没有 影响，为新型抑菌剂在工业酒精发酵杂菌控制中的应用提供了参考。 关键词：酒精发酵；污染菌；葡萄糖氧化酶；溶菌酶 酿酒酵母工业酒精发酵使用淀粉类原料做碳源， 物¨41和功能酶¨51等新型抑菌剂可以有效抑制污染 为了维持糖化酶活性，糖化过程温度只有50℃左右。 的杂菌，同时不会对环境造成危害¨…。随着环境保 同时工业酒精发酵设备管道繁多，厌氧或兼性厌氧污 护逐渐受到政府和社会的高度重视，新型抑菌剂的应 染菌可由原料、水、空气、管道以及设备死角等带入发 用成为解决工业酒精发酵杂菌污染的环境友好型途 酵过程，因此，酒精发酵不是严格无菌的过程¨‘2。。 径之一，如：葡萄糖氧化酶可以专一地将葡萄糖氧化 这些污染菌繁殖会消耗大量的碳源、氮源和氨基酸等 成葡萄糖酸和过氧化氢，葡萄糖酸能够降低发酵液中 营养物质，从而降低酵母生长速率，减少生物量，甚至 pH值，同时过氧化氢是广谱杀菌剂，均可以达到抑菌 导致酵母的死亡¨。4。。常见的污染菌一般有醋酸 效果Ⅲ。。溶菌酶可以水解细菌细胞壁肽聚糖起到抑 菌”。和乳酸菌∞。，它们可以在低pH、高酒精度以及 菌作用，对没有肽聚糖组分的酵母细胞壁没有影响。 低溶氧下生存，并且生成乙酸和乳酸。此外，污染菌 本文对酒精发酵污染液中的杂菌进行分离、纯化 的酸代谢会降低发酵液的pH，抑制酵母菌、淀粉酶和 和鉴定，确定杂菌主要为泛菌。由于文献中报道酒精 糖化酶的活力，降低酒精的产率“。。 发酵污染菌主要是醋酸菌和乳酸菌，而泛菌很少报 为了抑制工业酒精发酵过程中的杂菌污染，工业 道。因此，通过酵母一泛菌混合发酵模拟染菌状态，并 上一般应用酸处理或者添加抗生物素的方法。酸处 侧重研究了不同抑菌剂(葡萄糖氧化酶、溶菌酶)对 理是添加硫酸到酵母发酵醪中，利用酵母对氢离子的 泛菌和酵母生长代谢的影响，旨在为工业酒精发酵过 耐受性强于细菌的特性，维持pH值为3．5左右以抑 程中对杂菌的控制提供理论依据和技术指导。 制杂菌的生长¨…。酸处理不当可能会降低酵母的活 性，废液中硫离子浓度过高也会增加废水处理的难 1 材料与方法 度，对环境有较大污染，不能作为工业上控制酒精发 1．1主要材料、试剂与仪器 酵过程染菌的长久方法¨。”1；而添加抗生素如青霉 酒精发酵污染液(来源于安特食品股份有限公 素、氯霉素、土霉素等，除了很容易产生细菌耐药性以