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北师大版高中生物选修1生物技术实践培养基对微生物的选择作用.ppt
任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌,以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 常用的灭菌的方法有:干热灭菌、高压蒸汽灭菌、常压蒸汽灭菌、常压间歇式灭菌超高温灭菌、过滤除菌、辐射灭菌、化学药品灭菌等方法。 本实验培养基的灭菌常使用的是高压蒸汽灭菌,它是利用高温湿热空气使菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的。 (二)培养基的灭菌 高压蒸气灭菌 一般培养基: 1.05 Kg/cm2, 121.3℃, 15-30 min 含糖培养基: 0.56 Kg/cm2, 112.6 ℃, 15-30 min 培养基的灭菌 器皿的灭菌: 干热空气: 160℃, 2 小时 无菌室的消毒: 紫外光 化学药物熏蒸(苯酚;高锰酸钾+甲醛) 灭菌锅 湿热灭菌使用的设备 操作过程 加水?装锅?盖盖?加热?当压力升为0.5kg/cm2时排放冷空气?正式升压?保压(1.1kg/cm2,121℃,保持20-30min)?停止加热?自然降压至零?排放余汽?开盖?取出灭菌物品?趁热摆斜面?检验灭菌效果。 本次实验报告内容 记录本实验配制培养基的名称、数量,并图解说明其配制过程,指明要点。 思考题 培养基配制完成后,为什么必须立即灭菌?若不能及时灭菌应如何处理?已灭菌的培养基如何进行无菌检查? 实 验 报 告 下次实验时上交 培养基对微生物的选择作用 课堂纪律 严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退 迟到 工作服 进入微生物实验室的注意事项 1.进入实验室必须穿白大褂 2.实验室内不准吃东西 3.在实验室内不要趴在桌子上 4.实验完成后值日生留下做好清洁工作(值日工作实行组长负责制,纳入实验成绩) 5.离开实验室前洗手 6.实验现象要隔天观察的实验,必须要按时到实验室记录实验现象 实验安排 实验一 微生物培养基的配制和灭菌 实验二 微生物的纯培养技术 实验三 显微镜油镜的使用及细胞形态的观察 实验四 土壤、水的细菌学检查 实验五 放线菌、霉菌及酵母菌的形态观察 实验六 环境因素对微生物的影响 实验七 微生物生理生化反应观察 实验八 微生物遗传实验 实验报告要求 一个实验,一份实验报告,有连续性的实验等到做完后再写实验报告。 实验报告内容: 1.实验项目名称 2.实验目的 3.实验原理 4. 实验步骤 5.实验结果与分析(即使实验失败也要写好分析) 6.思考题 实 验 一 微生物培养基的配制和灭菌 一、实 验 目 的 了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程。 掌握加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 (一)培养基的配制 二.实 验 原 理 1. 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。不同微生物对营养物质的要求各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 培养基按成分可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基;按物理状态可分为固体培养基、半固体培养基(0.2%~0.5%的琼脂)和液体培养基;按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基和选择培养基等。 培养基 是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。 培养基简介 碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水 营养物质的浓度要适宜 营养物质之间的配比要适宜 培养基的pH值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件要适宜。 细菌: pH 7.0~8.0 放线菌:pH 7.5~8.5 酵母菌: pH 3.8~6.0 霉菌:pH 4.0~5.8 藻类: pH 6.0~7.0 原生动物: pH 6.0~8.0 初始pH 通常培养条件: 培养基的种类 按照培养基的物理状态可分为 1.液体培养基:不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基:在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基。 3.半固体培养基:在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。 琼脂是最优良的凝固剂,自1880年开始用于配制微生物培养基以来,至今经久不衰。
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