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【典例训练2】下图所示为胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作,接入试管后,在一定条件下,形成试管苗的培育过程。请据图回答下列问题: (1)要促进细胞分裂生长,培养基中应有营养物质和激素。营养物质包括 和小分子有机物,激素包括细胞分裂素和 两类植物激素。 (2)此过程依据的原理是 。A和B阶段主要进行的分裂方式是 ,B阶段除了细胞分裂外,还进行细胞 等。 (3)此过程要无菌操作,主要是指对 进行灭菌消毒。B阶段需要光照,原因是 。 (4)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞具有叶绿素,这是 的结果。 (5)A、B两过程能否在同一培养基上进行? 。 【解题关键】解答本题需具备以下知识: (1)组织培养时培养基中的成分; (2)组织培养的过程; (3)组织培养时的注意事项。 【解析】植物组织培养是用离体的植物组织、器官或细胞接种到经消毒灭菌的培养基中,培养基含有供组织细胞生长发育所需要的无机物和小分子有机物,还有供调节细胞脱分化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育到试管苗,脱分化阶段细胞进行有丝分裂;再分化阶段愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗,此阶段需要光照,原因是叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件。由于细胞分裂素和生长素对脱分化、再分化的作用不同,因此需配制不同浓度比值的生长素、细胞分裂素培养基,通过转接以便顺利完成脱分化和再分化。 答案:(1)无机物 生长素 (2)细胞的全能性 有丝分裂 分化 (3)培养基 芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件 (4)基因选择性表达 (5)不能 三、植物体细胞杂交 1.植物体细胞杂交的障碍: (1)植物细胞都有细胞壁。根据酶的专一性原理,用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。 (2)原生质体融合。人工诱导方法包括物理法,如离心、振动、电激;化学法,如聚乙二醇(PEG)。 2.杂种植株遗传物质的变化: 细胞融合属于染色体变异,杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和;染色体组数通常也是两亲本细胞染色体组数目之和,形成异源多倍体。 3.植物体细胞杂交的原理: 原生质体融合的过程利用了细胞膜的流动性,杂种细胞发育成杂种植株利用了细胞的全能性。 4.该技术的目的和优点: (1)植物体细胞杂交的终点:是培育成杂种植株,而不是形成杂种细胞就结束。 (2)在育种上应用时最大的优点:克服远缘杂交不亲和的障碍。 【易错提醒】植物细胞融合的三点提醒 (1)依据:植物细胞融合依据的生物学原理是细胞膜的流动性。 (2)融合成功的标志:杂种细胞再生出细胞壁。 (3)融合细胞类型:体细胞融合成功后,将得到AB型、AA型和BB型三种细胞,但只有AB型是杂种细胞,因此,在细胞融合后还应有一个筛选杂种细胞的过程。 【典例训练3】以下为植物体细胞杂交技术流程图,其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞,所含有的染色体组分别是AA和BB。据图分析回答: (1)①过程发生的化学变化是 。 (2)将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养,再经过②和③,c的细胞类型有 (不考虑三个或三个以上的细胞融合)。 (3)在采用化学法进行过程②时,一般是用 作为诱导剂。 (4)植物体细胞杂交与自然状况下的生殖细胞杂交相比,前者的主要意义是 。 【解题关键】解答本题应注意以下几点: (1)明确植物体细胞杂交的基本过程; (2)明确获得的杂种植株中染色体组成情况; (3)理解植物体细胞杂交的意义。 【解析】(1)体细胞杂交亦称为原生质体融合,是以植物体细胞为材料,经特殊的酶处理后,用去掉了细胞壁的裸细胞——原生质体为亲本,进行融合的一种新型的生物技术。 (2)将若干a和b等量混合后转移到培养基上培养,经过细胞融合,c的细胞类型包括没有融合的细胞、相同细胞的融合和不同细胞的融合,即AA、BB、AAAA、BBBB、AABB。 (3)在采用化学法进行过程②时,一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。 (4)植物体细胞杂交的主要意义是克服了不同生物间远缘杂交不亲和的障碍。 答案:(1)纤维素和果胶发生水解(或者纤维素分解为葡萄糖,果胶分解为半乳糖醛酸) (2)AA、BB、AAAA、BBBB、AABB (3)聚乙二醇(PEG) (4)克服了不同生物间远缘杂交不亲和的障碍 【互动探究】 植物体细胞杂交获得的杂种植株一定能获得两个亲本的优良性状吗?为什么? 提示:不一定。两种植物细胞的基因集中到一个细胞中,基因间的表达可能相互影响:影响基因表达的因素发生了变化,基因表达的环境也发生了变化,导致一些基因不能表达,因此有的性状
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