（江苏专版）2017版高考生物一轮复习第十五单元生物技术实践（第50课时）DNA的粗提取与鉴定讲义.pptVIP

江苏版生物 第50课时　DNA的粗提取与鉴定 考纲内容 要求 命题特点 备考指南 DNA的粗提取与鉴定 b ?考查内容:DNA的粗提取 与鉴定 ?考查形式:常以文字叙述 形式或结合实验装置图进行综合考查 (1)熟悉教材实验内容,理解实验原理、常用试剂及其使用方法与目的 (2)联系DNA的化学性质,通过实验操作,掌握提取DNA的原理、方法步骤和注意事项等 (3)通过“DNA的鉴定”实验,掌握鉴定DNA的原理、方法和注意事项等 考点突破 ? 考点一　DNA粗提取与鉴定的原理 1.提取生物大分子的基本思路 选用一定的①???? ????方法分离具有不同②???? ????的生物大分子。 2.DNA的溶解性 (1)利用DNA溶解性分离DNA a.DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度③???? ???。 教材研读 物理或化学 物理或化学性质 不同? b.选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到④???? ????目的。 (2)DNA⑤???? ????酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则⑥??? ????酒精。利用这一原理,可以将⑦???? ????进一步地分离。 3.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 (1)蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA⑧???? ????影响。 (2)大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在⑨???? ????℃以上才会变性。 (3)洗涤剂能够瓦解⑩???? ????,但对DNA????? ???影响。 分离 ?溶于 不溶于 DNA与蛋白质 没有 80 细胞膜 没有? 在????? ????的条件下,DNA与????? ??反应呈现????? ????,因 此????? ????可以作为鉴定DNA的试剂。 4.DNA的鉴定 沸水浴 二苯胺?? 蓝色 二苯胺 考点二　“DNA的粗提取与鉴定”主要步骤及注意事项 1.实验材料的选取:选用DNA含量相对①???? ????的生物组织。 2.破碎细胞,获取含DNA的滤液 (1)动物细胞的破碎——以鸡血为例 在鸡血细胞液中加入一定量的②　 ?,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集③　 ????即可。 (2)植物细胞的破碎——以洋葱为例 先将洋葱切碎,然后加入一定的④　 ????和⑤　 ????,进行充分地 ⑥　 ????和⑦　 ????,过滤后收集⑧　 ????。 较高 蒸馏水??? 滤液 洗涤剂 食盐 搅拌 研磨 研磨液 (1)方案一:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的⑨　 ????去除杂质。 (2)方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,嫩肉粉中的⑩　 ???? 能够分解蛋白质。 (3)方案三:将滤液放在60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min,注意严格控制温度范围,使?　 ???沉淀析出而DNA分子还未变性,可以将 DNA与蛋白质分离。 4.DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于?　 ????的?　 ????溶液(体积分数为95%)这一原 理,可从滤液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为?　 ?。 3.去除滤液中的杂质 浓度 木瓜蛋白酶 蛋白质? 冷却 酒精 白色丝状物??? 5.DNA的鉴定 将呈?　 ????的DNA溶解于5 mL物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶 液中,再加入4 mL的?　 ????试剂,?　 ??加热5 min,冷却后观 察溶液的颜色。注意要同时设置?　 ??实验。 6.操作提示 (1)以血液为实验材料时,每100 mL血液中需要加入3 g?　 ?,防 止?　 ????。 (2)加入洗涤剂后,动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要?　 ??,以免加剧DNA分子的断裂,导致 DNA分子不能形成絮状沉淀。 (3)二苯胺试剂要?　 ????,否则会影响鉴定的效果。 丝状物 二苯胺 沸水浴?? 对照?? 柠檬酸钠??? 血液凝固 轻缓?? 现配现用 ? 1.(2014江苏单科,16A)酵母和菜花均可作为