四种药品微生物快速鉴定技术的方法学一致性评价.docxVIP

四种药品微生物快速鉴定技术的方法学 nr; 一致性评价 杨燕蒋波鲍英徐伟东钟玮李芳范一灵冯震 杨美成 上海市食品药品检验所 摘要： 目的对4种药品微生物快速鉴定技术的鉴定结果进行比较分析,建立一种用于 药品微牛物鉴定技术的评价方法。方法以19株标准菌株和10株野牛菌株为参 考，分别采用API微生物鉴定系统、VITEK 2 Compact全自动微生物鉴定系统、 RiboPrinter全自动微生物基因指纹鉴定系统和MicroSeq ID DNA测序系统对其 进行不少于50次的鉴定，计算各鉴定方法在属水平和种水平上的准确性及重现 性。结果4种鉴定技术均可用于药品控制菌的鉴定，在非控制菌中存在明显差界, 分子牛物学技术的准确性和重现性均优于牛化鉴定技术。结论实验室应对微牛 物鉴定系统进行确认，谨慎评价所用方法及其使用范围。 关键词： 生化鉴定;分子生物学;准确性;重现性;一致性评价; 作者简介：杨燕，女，硕士，药师，研究方向：生物化学与分子生物学 作者简介：杨美成，女，博上，主任药师，研究方向:质量管 理，Tel: (021 E-mail:yangmeicheng@vip. sina. com 收稿日期：2016-02-17 基金：中国药典标准提高研究项目(1200) Evaluation of Four Kinds of Rapid Identification Technologies of Microbials in Pharmaceutical Products YANGYan JIANG Bo BAO Ying XU Wei-dong ZHONG Wei LI Fang FAN Yi-ling FENG Zhen YANG Mei-cheng Shanghai Institute for Food and Drug Control; Abstract： OBJECTIVE To establish a evaluation method of microbial idenlification tech no logy by comparing four different microbial i den ti fica tion methods. METHODS A total of 50 tests by API microbial identification system, VITEK 2 compact system, Riboprinter system, and Micro Seq ID DNA sequencing system were performed against 19 standard strains and 10 wild strains. The accuracy and reproducibility of these met hods were evaluated. RESULTS Al 1 the four identification technologies could be used to identify specified micro-organisms，but they had differcncc in other strains. Molecular biotechnology was better than biochemical identification in accuracy and reproducibility. CONCLUSION The users should establish suitable acceptanee criteria for accuracy and reproducibility, taking into account method capability. Keyword： biochemical identification; molecular biotechnology; accuracy; reproducib订ity; cossistency evaluation; Received： 2016-02-17 微生物的鉴定方法可分为表型鉴定和基因型鉴定两类。《美国药典》、《欧洲药 典》、《口本药典》等国外药典，在微生物限度检查章节屮对控制菌的检查均采 用表型鉴定的方法，此类方法不依靠仪器设备，操作简单易行，通用性强;但涉及 试验较多，对操作人员的经验要求高，耗时较长、步骤繁琐,难以对控制菌进行大 量、快速和准确的鉴定［1-2］。除控制菌检查章节外，《日本药典》第16版和《美 国药典》37等均补充了微生物的基因型鉴定和分型方法。 2015年版《屮国药典》在微生物检验方面做了较大的改动。对于样品及试验过