新生小鼠脑切片体外循环灌流模型中白质损伤的研究-中国胸心血管.PDFVIP

中国胸心血管外科临床杂志 2017年4月第24卷第4期 • 295 •   ·论著·基础研究· 新生小鼠脑切片体外循环灌流模型中白质 损伤的研究 1 1 1 1 2 黄骏荣 ，祝忠群，刘刚，陈会文，冯林音 1. 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 心胸外科（上海  200127 ） 2. 中国科学院上海药物研究所（上海  201203 ） 【摘要】   目的    通过建立新生小鼠脑切片体外循环灌流模型，探讨该模型能否复制体外循环（CPB ）和深低 温停循环（DHCA ）下脑损伤病理生理状态，并研究脑切片灌流及氧糖剥夺（OGD ）是否造成白质中少突胶质前体 细胞（preOL ）的损伤，为体外循环对白质损伤提供细胞学证据。方法    将 40 只 7 天龄 Sprague-Dawley 大鼠，平均 体质量（14.7±1.5）g ，随机制作活体脑切片, 每只大鼠约切出 3 ～5 片脑切片。根据灌注方式和温度不同分为 5 组， 每组含脑切片 24 片：对照组全程人工脑脊液（aCSF ）灌流（36 ℃）；实验组在不同温度（36 ℃，32 ℃，25 ℃ 和 15℃）OGD 60 min，建立离体脑切片灌流系统，模拟心脏手术 CPB/DHCA 整个过程。应用免疫组化检测髓鞘碱性 蛋白 MBP 及少突胶质细胞标记物 O4 抗体评价少突胶质细胞损伤程度。结果    在 OGD 实验组中，成熟少突胶质 （MBP 阳性）细胞存在明显损伤，其形态学明显变化和荧光表达明显减少，而且 OGD 温度越高，损伤也越严重； preOL （O4 阳性）细胞在 36 ℃，32 ℃ 及 25 ℃ 组均出现不同程度的荧光表达减少，且 OGD 温度越高，荧光表达减 少越明显，O4 阳性细胞的形态学和荧光表达改变在对照组及 15 ℃ OGD 组之间差异无统计学意义。结论    本模 型能有效模拟 CPB/DHCA下脑损伤病理生理状态，而且这种损伤可导致少突胶质细胞系发育关键阶段的 preOL 的损伤，分化为下游的少突胶质细胞（OL）数量减少，最终导致轴突低髓鞘化和白质损伤。 【关键词】  先天性心脏病；体外循环；深低温停循环；白质；少突胶质前体细胞 White matter injury after cardiopulmonary bypass in a brain slice model of neonatal rats with perfusion 1 1 1 1 2 HUANG Junrong , ZHU Zhongqun , LIU Gang , CHEN Huiwen , FENG Linyin 1. Department of Cardiothoracic Surgery, Shanghai Children’s Medical Center, Shanghai Jiaotong University School of Medicine, Shanghai, 200127, P.R.China 2. Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences, Shanghai, 201203, P.R.China Corresponding author: ZHU Zhongqun, Email: zzqheart@ 【Abstract 】 Objective    Through establishment of brain slice model in rats with perfusion and oxygen glucose deprivation (OGD), we investigated whether this model can