siRNA沉默PTP4A1表达对人舌鳞癌细胞系TCA8113体内外生物学行为的影响.docVIP

siRNA沉默PTP4A1表达对人舌鳞癌细胞系TCA8113体内外生物学行为的影响 漆小娟，季 平，潘 丽，时恩来，徐 望 （400016重庆，重庆医科大学附属口腔医院颌面外科，重庆市口腔疾病与生物医学研究中心） [摘要] 目的 特异性沉默人舌鳞癌细胞系TCA8113 中PTP4A1基因的表达，并研究沉默该基因表达后对TCA8113细胞体内外生物学行为的影响。 方法 采用siRNA 的慢病毒载体siRNA-PTP4A1作为阳性干扰组（KD），空病毒载体作为阴性对照组(NC)，未作任何处理的TCA8113细胞作为空白对照组(CON)。Real-time PCR和Western blot检查PTP4A1基因的干扰效果，MTT法检测3组细胞的增殖能力，流式细胞技术分析3组细胞凋亡和细胞周期情况，平板克隆形成实验检测体外克隆形成能力，Western blot分别检测3组细胞抑制凋亡蛋白bcl-2、促凋亡蛋白bax的表达情况，3组细胞分别裸鼠成瘤后观察移植瘤的生长情况。 结果 siRNA-PTPA1转染TCA8113细胞成功，Real-time PCR和Western blot检测PTP4A1基因的抑制率达到65%和60%以上（P0.05）；MTT结果显示KD组细胞增殖能力小于NC、CON组；细胞凋亡率也明显增加，KD组早期凋亡为（17.48±0.70）%，而NC、CON组的早期细胞凋亡率为（7.34±0.70）%和（4.86±0.25）%(P0.01)；KD组细胞周期阻滞在G1/G0和S期(P0.05)；Western blot结果显示bcl-2蛋白表达降低(P0.01)，bax蛋白表达增高(P0.01)；KD组体外克隆形成数小于NC、CON组(P0.01)；KD组裸鼠移植瘤的生长速度缓慢，质量和体积均小于NC、CON组(P0.01)。 结论 siRNA PTP4A1在体内外均能有效抑制舌鳞癌TCA8113细胞的恶性生物学行为，PTP4A1基因可能与舌鳞癌的发生发展相关。 [关键词] TCA8113；PTP4A1；siRNA;生物学行为 [中图法分类号] R739.8 [文献标志码] A [通信作者] 季 平，E-mail：jiping_62@ Influence of silencing of PTP4A1 gene by lentivirus vector siRNA on biological behavior of TCA8113 cells in vivo and in vitro Qi Xiaojuan, Ji Ping, Pan Li, Shi Enlai, Xu Wang (Department of Stomatology, Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Department of Oral and Maxillofacial Surgery,Chongqing Oral Disease and Biomedical Research Center , Chongqing,400016,China) [Abstract] Objective To study the effect of silence PTP4A1 gene expression by lentiviral vector mediated siRNA and its effect on biological behavior in human tongue squamous cancer cell line TCA8113. Methods There were three groups ,KD:siRNA-PTP4A1 treated TCA8113 cells group;NC:empty lentivirus treated TCA8113 cells group;CON:no treatments TCA8113 cells groups.Real-time PCR and Western blot analysis detected the expression of PTP4A1.MTT analysis was used to detect the inhibition of cell proliferation. Flow cytometry was proformed to detect the cell apoptosis and cell cycle. Bcl-2 and bax protein expression leve