非结核分枝杆菌诊断与治疗进展.pptx

非结核分枝杆菌感染诊断与治疗进展;;;;分枝杆菌;抗酸染色;;分枝杆菌分类;非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria);;;流行病学;流行病学;非结核分枝杆菌分离率;流行病学;流行病学;致病机制;致病机制;;分枝杆菌的鉴定;;分枝杆菌鉴定;分枝杆菌鉴定;吖啶酯标记的?DNA?探针 几种商业化的?DNA?探针已被美国食品药品管理局推荐用于?NTM?菌种鉴定，包括?MAC、堪萨斯分枝杆菌（Mycobacterium kansasii?和戈登分枝杆菌等 原理是以菌种特异度探针与分枝杆菌的?16S rRNA?进行杂交，从培养阳性的标本中获得结果仅需?2h 仅能用于鉴定少数?NTM?菌种;PCR-?限制性片段长度多态性分析法（即?PCR-?限制性核酸内切酶分析） 通过?PCR?扩增热休克蛋白65（Hsp65）基因的?441 bp?碱基序列?DNA?片段，再经酶切消化后形成?NTM?种特异性的酶切小片段，经放射自显影或染色技术即可鉴定出不同的?NTM?茵种 抗酸染色结果分别为?+++、++?和?+?的痰标本?NTM?检出率分别为?100%、95%?和?53%，且与培养和基因测序结果相一致，提示该方法可直接用于临床痰标本分枝杆菌的菌种鉴定;DNA?测序技术 该技术通过对编码?16S?核糖体?DNA（rDNA）的?16SrRNA?碱基序列进行测定，16S rRNA?含有?1500?个核苷酸序列，具有分枝杆菌所共有的高度保守区和核苷酸序列超可变区?A?和?B，通过对超可变区?A?进行测序，可以鉴定出大多数?NTM?菌株，而未知的?NTM?菌株和超可变区?A?不能鉴定的NTM?菌株则要通过对超可变区?B?进行测序来明确 由于?NTM?相近的菌株间存在相似的?16S rRNA?碱基序列，因此结果会存在误判;DNA?焦磷酸测序技术 该技术对临床分离分枝杆菌菌株?16S rRNA?核苷酸序列的超可变区?A?进行分析，并与其他菌种鉴定方法进行比较，其符合率超过?90%，且5h?内可出结果，费用较为低廉 目前已有自动化的商品?MicroSeq 500 16S rDNA?测序试剂盒，可对?NTM?中500?个核苷酸序列进行分析，以及与之匹配的商业化数据库可供使用，问题是这种数据库不能涵盖所有?NTM茵种信息，尤其是未知的?NTM?菌种;来自美国、英国、南非的研究人员合作开发出一种酶联免疫吸附试纸，检测尿液标本结核分歧杆菌特异性成分抗原 TB-LAM，即 TB-LAM 试纸。用该试纸进行一项描述性研究结果显示其具有较高的灵敏度，非常适合应用于筛查 CD4 偏低的 HIV 感染患者是否感染结核分歧杆菌;GeneXpert?系统是世界上唯一一个将样品准备、定量扩增和荧光检测完美集于一身并自动进行核酸检测分析的系统。?30分钟之内得出结果 ;;Xpert MTB/RIF?检测试剂盒为美国Cepheid公司开发的，适用于GeneXpert仪器 可以在2小时内直接时间从病人新鲜痰液或冻存痰液中检测是否还有结核分枝杆菌及对利福平的耐药性 整个过程都在一密闭环境中进行，手动时间短，不超过5分钟，对操作者和周围环境安全;GenoType MTBDRplus：线性探针技术 是WHO推荐的TB耐药分子诊断方法之一，该方法可以在6小时内得到结核分枝杆菌及其耐药性的检测结果 主要也是采用杂交的检测原理，在试纸条上标记有目标探针，通过核酸扩增杂交后，观测条带的出现情况，通过比对来判断结核分枝杆菌复合群及其相关的耐药情况 在鉴定结核分枝杆菌复合群的情况下，可以对利福平和异烟肼的耐药性进行判读。耐药性的检测也是通过对rpoB、katG及inhA基因常见的突变位点检测来获得的;;NTM临床表现;;NTM肺病;NTM肺病的临床症状和体征与肺结核极为相似，全身中毒症状等较肺结核轻，患者的临床表现差别较大 有的人没有明显症状，由体检发现 有的人已进展到肺空洞，病情严重 多数人发病缓慢，常表现为慢性肺部疾病的恶化 可有急性发病；可有咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、气急、盗汗、低 热、乏力、消瘦和萎靡不振等症状。3“ ;X线胸片显示炎性病灶及单发或多发的薄壁空洞，而纤 维硬结灶、球形病变及胸膜渗出相对少见。病变多累及上叶尖段和前段 胸部CT，尤其是高分辨CT可清楚显示NTM肺病的肺部病灶，可有结节影、斑片及小斑片样实变影、空洞(尤其是薄壁空洞)影、支气管扩张、树芽征、磨玻璃影、线状及纤维条索影、胸膜肥厚粘连等表现，且通常以多种形态病变混杂存在口;NTM肺病;NTM淋巴结病;累及部位最多的是上颈部和下颌下淋巴结，耳部、腹股沟和腋下淋巴结也可受累，单侧多见，双侧少见 大多数患者无全身症状和体征，仅有局部淋巴结受累的表现，无或有轻度压痛，可迅速软化、破溃形成慢性窦道 分枝杆菌抗原皮肤