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凝血四项（PT、APTT、FIB、TT）操作规程目录 凝血酶原时间（PT）测定 活化部分凝血酶原时间（APTT）测定 纤维蛋白原（FIB）测定 血酶时间（TT）测定 贺州市广济医院检验科 作业指导书 凝血酶原时间（PT）测定 编号： 版本： 生效日期： 第页 共页 测定原理：待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶，重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子 = 10 \* ROMAN X成为 = 10 \* ROMAN Xa ，后者使凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆凝血酶原时间。 试剂主要组成成分： 1．PT试剂：10瓶 （内含脑粉提取物、缓冲液、稳定剂、防腐剂） 本批试剂国际敏感指数ISI值：见瓶标 2．PT缓冲液：1瓶 （内含缓冲液、稳定剂、防腐剂） 注：不同批号试剂盒中各组分不可互换 操作步骤 试剂重建与保存 每瓶试剂加入2.0ml缓冲液轻摇溶解。 半自动血凝仪测定 取待测血浆（正常质控血清或正常混合血浆）0.1ml ，37℃孵育3分钟，加入37℃预温PT试剂0.2ml，记录凝固时间，即为PT值。 数据处理 待测血浆PT 凝血酶原时间比值（PTR）＝ ———————————— 正常质控（混合）血浆PT 国际标准化比值（INR）＝PTRISI 参考值 10～14秒 以PTR表示：0.95～1.24；以INR表示：0.94～1.30 临床意义 用于体外人血浆中凝血酶原时间（PT）测定。PT测定是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验。也可作为外源性途径及共同途径凝血因子的定量试验，同时，也可用于口服抗凝剂治疗的监控。 PT延长：见于先天性凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ缺乏症，低（无）纤维蛋白原血症，DIC，原发性纤溶症，VitK缺乏，肝病，口服抗凝剂、肝素和FDP等。 PT缩短：见于先天性凝血因子Ⅴ增多，口服避孕药，高凝状态，血栓性疾病等。 储存条件及有效期：未开启试剂于2～8℃保存可稳定至标签所示失效日期；试剂复溶后于2～8℃可保存7天。试剂保存应防止冷冻。 编写： 审核： 批准： 批准日期 年 月 日 贺州市广济医院检验科 作业指导书 活化部分凝血酶时间 （APTT）测定 编号： 版本： 生效日期： 第页 共页 测定原理：待测血浆加入部分凝血活酶溶液，在Ca＋＋参与下纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需的时间，即为待测血浆活化部分凝血酶时间。 试剂主要组成成分： 1．APTT（鞣花酸）试剂：10瓶 （内含脑磷脂、鞣花酸、稳定剂、防腐剂） 2．0.025mol/L CaCl2：1瓶 （内含氯化钙、防腐剂） 注：不同批号试剂盒中0.025mol/L CaCl2可互换 操作步骤 试剂使用前振摇均匀。 半自动血凝仪测定 = 1 \* GB2 ⑴ 取待测血浆（正常质控血浆或正常混合血浆）0.1ml，加入37℃预温APTT试剂0.1ml ，37℃孵育5min 。 = 2 \* GB2 ⑵ 加入37℃预温0.025mol/L CaCl2溶液0.1ml ，记录凝固时间。 参考值 22～38秒 临床意义 用于体外人血浆中活化部分凝血活酶时间（APTT）测定。APTT测定是内源性凝血系统较敏感和常用的筛选试验，也可作为内源性途径凝血因子的定量试验，可检测除Ⅶ因子外的其它血浆凝血因子，特别是用于因子Ⅶ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ和前激肽释放酶的测定。同时，APTT测定可用于肝素治疗监控。 APTT延长：见于凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ减低，纤维蛋白原缺乏症，纤溶活力增强，抗凝物质存在（如血内肝素含量增加及口服抗凝剂）是监控肝素治疗的重要指标。 APTT缩短：见于高凝状态，血栓性疾病，如心肌梗塞、不稳定性心绞痛、脑血管病变、肺梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合症和肾病综合症等。 注意事项 实验材料不能有去污剂存在，否则测定结果会出现假性延长。 APTT（鞣花酸）试剂预温不可超过15分钟。预温试剂应按每天实际用量量取预热。 APTT（鞣花酸）试剂与血浆温育时间不宜少于5min 。 参考文献 详见说明书 编写： 审核： 批准： 批准日期 年 月 日 贺州市广济医院检验科 作业指导书 纤维蛋白原（FIB）含量测定 编号： 版本： 生效日期： 第页 共页 测定原理： 采用Clauss凝固法原理，高浓度凝血酶存在时，待稀释血浆的凝固时间与其纤维蛋