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第十章 谷氨酸与赖氨酸提取及精制技术 第一节 谷氨酸提取技术 目前国内谷氨酸提取工艺主要有等电点法、离子交换法与等电点—离子交换法等，下面主要介绍这三种方法。 一、等电点法提取谷氨酸 （一）谷氨酸发酵液的主要成分 对于正常发酵液，放罐时pH为6.5~7.2，呈浅黄色，表面有少量泡沫，有谷氨酸发酵的特殊气味，发酵液的主要成分以及含量见表10-1。 （二）谷氨酸的性质 1. 谷氨酸的立体异构 谷氨酸分为L型、D型、DL型三种，在动植物和微生物机体中天然存在的，都是L型谷氨酸，L型谷氨酸是味精的前体。 2. 谷氨酸结晶的特性 谷氨酸结晶具有多晶型性质，在不同条件下会形成不同晶型的谷氨酸结晶。通常分为α-型结晶和β-型结晶两种。 3. 谷氨酸的溶解度 在一定温度下，每100g水中所能溶解谷氨酸的最多克数，称为谷氨酸的溶解度。 ① pH值对谷氨酸溶解度的影响 谷氨酸等电点pH 3.22时，溶解度显著减少到最低点。 ② 温度对谷氨酸溶解度的影响 谷氨酸溶解度受温度影响较大，温度越低，溶解度越小，这是低温等电点法提取谷氨酸的依据。 ③ 杂质对谷氨酸溶解度的影响 发酵液中合有残糖、其它氨基酸、菌体及肢体物质等杂质，这些杂质都会影响谷氨酸的溶解度。 （三）影响谷氨酸结晶的主要因素 1.发酵液性质对结晶晶型的影响 ① 谷氨酸含量对结晶晶型的影响 若发酵液中谷氨酸含量过低，低于4.5%时，不容易达到过饱和度，即使提取温度很低，所形成晶核数量也不会太多。如果谷氨酸含量较高，在室温条件下已经容易形成β-型结晶，导致分离困难，影响谷氨酸收率，且谷氨酸含水量较大、纯度较低。 ② 菌体对结晶晶型的影响 当带菌体进行等电点提取谷氨酸时，如果菌体数量多，发酵液黏度大，易使结晶形成β-型结晶。 ③ 杂菌和噬菌体结晶晶型的影响 如果谷氨酸发酵感染杂菌和噬菌体，发酵液中胶体物质增多，泡沫多，残糖高，发酵液黏度大，容易形成β-型结晶。 ④ 残糖对结晶晶型的影响 如果发酵液残糖过高，不仅会影响谷氨酸的溶解度，而且易产生β-型结晶。 ⑤ 发酵液杂质对结晶晶型的影响 发酵液的杂质，如消泡剂，糊精、焦糖、蛋白质、色素等杂质，如果过多，对提取带来影响。 2. 温度对结晶晶型的影响 温度越低，析出α-型结晶纯度越高。当等电点调酸时,发酵液温度高于30℃, β-型结晶增加；当温度低于30℃，β-型结晶减少。温度在20℃以下时主要是α-型结晶析出。 3.降温速度对结晶晶型的影响 如果降温速度过快，不仅晶核小而多，结晶微细，而且会引起α-型结晶向β-型结晶转化，导致收率下降。 4. 加酸速度对结晶晶型的影响 发酵液加酸至pH5.0左右，加酸速度可以快一些；pH5.0以下，特别是接近育晶点，加酸速度要缓慢，发现晶核时，应立即停止加酸，育晶2 ~3h，使晶核成长壮大，再继续缓慢加酸至pH 3.2。 5. 投晶种与育晶对结晶晶型的影响 谷氨酸起晶有两种方法：自然起晶和加晶种起晶。一般来说，加晶种起晶，晶核容易控制，不易出现β-型结晶，但必须要选择质量好的α-型晶体作为晶种。投晶种一定要掌握好投放时间，根据结晶理论，应在发酵液处于介稳区时投入晶种。 6.搅拌对结晶晶型的影响 搅拌有利于晶体长大，避免“晶簇”生成，但搅拌太快，液体翻动剧烈，会引起晶体的磨损，对晶体长大不利，造成结晶细小。搅拌太慢，液体翻动不大，晶体容易下沉，pH和温度不均匀，引起局部pH过低，形成过多的微细晶核，造成结晶颗粒大小不均，不易与菌体分离，影响收率。一般搅拌转速以25~35r/min。 （四）带菌体低温等电点分批提取工艺 1. 工艺流程 2. 操作要点 ① 育晶前的加酸操作 当发酵液放到等电点罐以后，先降温至28℃左右，然后加入盐酸或硫酸（为降低生产成本，目前基本使用硫酸）调节pH值。为了缩短提取周期，根据目前国内发酵液谷氨酸含量情况，一般在pH5.0之前的加酸速度可以快些，在1~2