十二指肠钩虫和美洲钩虫抗原成分的分析-四川动物.PDF

三、保护和利用资源的建议 库、湖水禽资源不仅能为人类提供肉类、羽毛，还可为教学、科研提供标本，是开 展综合利用，发展多种经营的内容之一。但据了解这些资源均未合理开发利用，特建 议： (一)库、湖管理部门应根据本库、湖特点，制订保护和合理利用水禽资源的有效 措施。对国家规定保护的天鹅和鸳鸯等珍稀种类应严禁捕猎。其他如黑颈鸊鷉、凤头鸊 鷉、大麻、黑脸琵鹭、鸿雁、琵嘴鸭等数量较少的种类也应注意保护。 (二)上述库、湖水禽资源主要是鸭科鸟类，一般在每年11月底到12月初迁来，次 年2月底3月初开始迁走，在境内停息期间，可以组织猎捕，但应控制一定的猎获量， 防止过度猎杀而破坏资源。 (三)为水禽资源提供良好的栖息条件，注意防止水域的毒物污染，湖周灌丛和水 草等供水禽隐蔽、停息的环境，也应注意保护和培植。 参 考 文 献 郑作新 1976 中国鸟类分布目录(第二版) 科学出版社。 郑作新 1979 中国动物志(第二卷鸟纲雁形目) 科学出版社 四川资源动物志编委会 1980 四川资源动物志(第一卷) 四川人民出版社。 傅桐生等 1981 吉林省水鸟的种群组成及分布，野生动物 (3)：2—6。 十二指肠钩虫和美洲钩 虫抗原成分的分析 张声海 王秀珍 王稚秋 黎世涛 周 蕊 黄先翔 张秀芳 贺蓉君 ( 四 川 省 寄 生 虫 病 防 治 研 究 所 ) 随着寄生虫学免疫研究的进展，钩虫病的免疫研究逐渐受到人们的重视。近十几年 来，许多学者在免疫预防方面作了不少工作，特别是犬钩虫疫苗预防接种幼犬成功，为 人体钩虫的预防研究提供了可能性并打下了基础。在进行钩虫疫苗的研究中，探明抗原 的组成成分及其免疫原性，对制备、分离敏感性和特异性较高的钩虫疫苗可提供一些重 要的资料。DeSOWitz(1962)、Willams(1970)等仅对美洲钩虫抗原和犬钩虫抗原作 过一些免疫分析，尚未见到有关十二指肠钩虫抗原方面的报道。本文用生物化学和免疫 化学方法对十二指肠钩虫感染期蚴、童虫可溶性抗原、美洲钩虫童虫可溶性抗原进行了 抗原成分分析。 21 一、材料与方法 (一)抗原的制备 1． 收集十二指肠钩虫重感染患者的粪便，经水洗沉淀，取沉渣用双重平皿滤纸培 养法于27℃左右孵箱中培养十天，分离、计数钩蚴备用。 2． 用十二指肠钩虫和美洲钩虫的感染期蚴分别感染幼犬。十二指肠钩虫感染的幼 犬于感染后17—23天，美洲钩虫感染的幼犬于感染后29—42天解剖，分别从幼犬肠腔取 出童虫。 3． 用无菌生理盐水洗钩蚴三次，用巴氏吸管吸入玻璃匀浆器内，加入少量1／万 无菌硫柳汞生理盐水电磨三次，每次2—3分钟，然后将匀浆液吸入抗原并中，加1／万 无菌硫柳汞盐水使匀浆最终浓度为10％(V／V)。经超声 (300MA)处理25分钟，放 入-20℃反复冻融至显微镜检查幼虫呈碎片为止。用10000rpm离心30分钟，取上清液 装入无菌抗原并内，置-20℃保存备用。 童虫经无菌生理盐水洗三次，用滤纸吸干体表水份，分别称湿重，装入玻璃匀浆器 中，同法制成10％(W／V)的抗原液，于-20℃保存备用。 (二)抗血清的制备 十二指肠钩虫感染期蚴可溶性抗原、美洲钩虫童虫可溶性抗原分别加等量福氏完全 佐剂，按多部位免疫注射法免疫家兔获得抗十二指肠钩虫感染期蚴血清和抗美洲钩虫童 虫血清。 (三)分析方法 1． 比色分析：按Lowry改良酚试剂法测蛋白质含量，蒽酮法测多糖，二羟基甲苯 试验法测核酸。 2． 聚丙烯酰胺凝胶电泳：按莽克强等所描述的方法电泳，分离三种抗原的蛋白 质、多糖、脂蛋白、核酸各组分。经聚丙烯酰胺凝胶电泳后的抗原胶条分别置于具塞试管 中，用考马斯兰R 250染蛋白质，PAS染多糖，苏丹黑B染脂蛋白，派洛宁Y染核酸。 3． 凝胶等电聚焦测定三种抗原蛋白质组分的等电点范围。 4