成纤维样滑膜细胞原代培养及其在类风湿关节炎治疗机制-中国药房.PDF

·综述讲座· 成纤维样滑膜细胞原代培养及其在类风湿关节炎治疗机制研究 中的应用进展Δ 1＊ 2 1 1 3 1# 汪永忠 ，邓龙飞 ，韩燕全 ，姜 辉 ，李钰馨 ，夏伦祝 （1.安徽中医药大学第一附属医院/ 国家中医药管理局中 药制剂三级实验室，合肥 230031；2.上海奉贤区中医医院，上海 201400；3.安徽中医药大学药学院，合肥 230012） 中图分类号 R285.5 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2016）07-0966-04 DOI 10.6039/j.issn. 1001-0408.2016.07.31 摘 要 目的：综述成纤维样滑膜细胞（FLS ）及其在类风湿关节炎（RA ）药效作用机制研究中的应用进展。方法：以“成纤维样滑 膜细胞”“类风湿关节炎”“中药单体”“滑膜细胞”“Arthritis”“Fibroblast-like synoviocytes”为关键词，组合检索2006年1月－2015年 10月在PubMed 、中国知网、维普等数据库中对FLS 原代培养及其在RA 治疗机制研究中的应用文献进行总结和归纳。结果：共查 阅到相关文献68篇，其中有效文献32篇。FLS 原代培养成功率较高，培养方法多样且日趋完善，在RA 的治疗机制研究中得到了 广泛的应用；同时，中药及化学合成药、激酶抑制剂等可通过NF-κB 、Akt 等信号通路抑制炎症因子或相关蛋白基因从而达到治疗 RA 的目的。结论：FLS 体外试验在RA 相关研究中得到广泛的应用，治疗药物如中药及化学合成药、激酶抑制剂通过细胞分子水 平研究在信号通路的介导下都对RA 有治疗作用。 关键词 类风湿关节炎；成纤维样滑膜细胞；中药；药理 类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis ，RA ）是一种系统性自 法主要有组织块贴壁培养法、酶消化法等，临床患者的滑膜细 [4] 身免疫性疾病，病理特征主要为滑膜组织异常增生、血管翳生 胞因取材于人体，亦可采用机械分离法、关节液培养法 。 成、侵犯关节，最终可导致关节畸形甚至致残，影响RA 患者行 1.1 组织块贴壁培养法[5] [1-2] 在无菌条件下取出滑膜组织并处理，用D-Hank ’s 溶液冲 动能力及身心健康 。滑膜是由疏松结缔组织组成的膜性组 织，即为关节囊的内层。正常滑膜分为两层，即薄的细胞层 洗倒去洗液，倒入少量含10％胎牛血清的杜尔伯科改良伊格 （内腔层）和血管层（内膜下层），而RA 因滑膜组织类肿瘤样增 尔培养液（DMEM ），将滑膜组织剪碎，分散放置于培养瓶底 殖，单层的滑膜明显增厚肥大，炎性细胞不断迁移和浸润，引 壁，将培养瓶倒置翻转，使组织块面位于上方，倒入DMEM 培 起病变。1933年，Vaubel 首次在实验室培养出滑膜细胞，根据 养液，轻放培养箱中于37 ℃、5％CO 条件下培养。根据细胞 2 电镜特征可分为滑膜细胞A 、B 两型，即巨噬样滑膜细胞和成 生长情况及观察培养液的颜色变化，适时每1～3天更换培养 纤维样滑膜细胞（Fibroblast-like synoviocytes ，FLS ）。近年来 液，长满后可开始传代。 相关研究认为，FLS 在RA 滑膜病变中扮演了重要角色，参与 1.2 酶消化法[6] 了滑膜增生、致炎细胞因子及免疫反应介质的分泌，从而影响 取出滑膜组织，用D-Hank ’s 溶液冲洗3次，倒入少量10％