第十章胚胎干细胞的培养.pptVIP

能在体外增殖又具有胚胎细胞全能性或多能性的，并通过适当条件能被诱导分化为各种类型分化细胞的实验模型。 20世纪70年代，胚胎性瘤细胞（EC细胞）是畸胎瘤干细胞，具有恶性生长并显示类似于胚胎细胞发育的全能或多能的性质。 80年代初，从小鼠早期胚胎的内细胞团或桑椹胚分离建立了具有发育全能性的胚胎干细胞（ES细胞）。 近年,多能性胚胎生殖细胞系（EG细胞），被称为“干细胞之母”。 一、ES细胞和EG细胞培养和建系的基本技术 （一）饲养层细胞 不论ES细胞或EG细胞，原代或初代培养阶段一般都须依赖于能分泌它们在体外存活增殖所必需生长因子的饲养层细胞。保持活性但不分裂增殖 1 MEF细胞 小鼠胚胎成纤维细胞 2 STO细胞 来自于SIM小鼠胚胎的硫代鸟嘌呤和乌本苷有抗性的成纤维细胞系。 二、胚胎细胞的来源 采用超排途径 1 主要材料 动物：雌雄小鼠 激素：PMS、HCG 2 获取胚胎的过程 （1）雌鼠，5IU PMS，48h后 5IU HCG （2）雌雄合笼，自然交配，次晨查阴道栓为交配后0.5d（即0.5dpc）。 （3）3-4d，分别剖取子宫，冲出子宫内桑椹胚和早期胚泡进一步分离培养ES细胞。8.5-10.5dpc时的胚胎生殖嵴可