基因工程基本操作程序和基因工程实际应用.pptVIP

归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、Ca2+处理法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定：个体生物学水平的鉴定 2.动物基因工程前景广阔 ①用于提高动物生长速度 目的基因： 生长激素基因 例如： 将外源生长激素基因导入鲤鱼体内，9个月后转基因鲤鱼比对照组重1.5Kg。 转入生长激素基因的鱼（上）和同龄的鱼 肠乳糖酶基因 例如： 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，使转基因奶牛中乳糖含量大大降低。 ②用于改善畜产品品质 目的基因： 2.动物基因工程前景广阔 药用蛋白基因 ③用转基因动物生产药物 目的基因： 过程： 获取目的基因 （药用蛋白基因） 构建基因表达载体 （药用蛋白基因与乳腺蛋白基因启动子等调控组件重组） 显微注射 （哺乳动物受精卵中） 形成胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物 （只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达） 动物进入泌乳期 （分泌的乳汁中包含所需要的药物） 2.动物基因工程前景广阔 乳腺生物反应器： ③用转基因动物生产药物 指以转基因雌性动物个体的乳腺分泌乳汁来生产所需药品。 优点： 产量高 质量好 成本低 易提取 成果： 抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素、α－抗胰蛋白酶 2.动物基因工程前景广阔 ④用转基因动物做器官移植的供体 供体动物： 猪 存在难题： 解决方法： 将供体基因组导入某种基因调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。 免疫排斥 （T细胞） 3. 基因工程药物 在传统的药品生产中，某些药品直接从生物的组织、细胞或血液中提取。 如胰岛素从生物胰腺中提取，干扰素从血液中提取。 传统生产方法的缺点 由于受原料来源的限制，数量少且价格十分昂贵。 可利用什么方法来解决上述问题？ 利用基因工程方法制造“工程菌”，可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。 一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取，每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低，价格昂贵，远不能满足社会需要。 1979年，科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组，并在大肠杆菌内实现了表达。 基因工程药品 —— 胰岛素 3. 基因工程药物 干扰素是病毒侵入细胞后产生的一种糖蛋白。几乎能抵抗所有病毒引起的感染，是一种抗病毒的特效药。此外对治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。 传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取出1mg干扰素。 基因工程药品 —— 干扰素 3. 基因工程药物 治疗侏儒症的唯一方法，是注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前，要获得生长激素需解剖尸体，从大脑的底部摘取垂体，并从中提取生长激素。 现利用基因工程方法，将人的生长激素基因导入大肠杆菌中，使其生产生长激素。 人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素，相当于6万具尸体的全部产量。 基因工程药品 —— 生长激素 3. 基因工程药物 目前我国生产的基因工程药物有白细胞介素－2、干扰素、乙肝疫苗等。 * 基因工程的基本操作程序及基因工程的应用 ① 目的基因的获取 ② 基因表达载体的构建（核心） ③ 将目的基因导入受体细胞 ④ 目的基因的检测与鉴定 四 个 步 骤 一、目的基因的获取 (一)、目的基因主要是___________________ 编码蛋白质的基因 （二）、获取目的基因的常用方法 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增 人工合成 1)基因文库？ 1. 从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片断，导入到受体菌的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库 2)基因文库的种类: 种类 基因组DNA文库：含有一种生物的全部基因 部分基因文库：只包含了一种生物的部分基因， 如：cDNA文库 ①概念： PCR全称为_______________，是一项在生物____复制________________的核酸合成技术。 多聚酶链式反应 体外 特定DNA片段 （2）利用PCR技术扩增目的基因 ②过程 1. 变性（95℃）双链DNA模板在热作用下，_____断裂，形成________ 氢键 单链DNA 2.复性 (55℃)温度降低， 与DNA模板结合，形成局部______。 双链 引物 3.延伸（72℃） 在 的作用