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再生(regeneration)有生理性和病理性两种。生理性再生是指在生理过程中,一些细胞、组织不断老化、消耗、由新生的同种细胞不断补充,始终保持原有的结构和功能,如消化道上皮约1~2天就更新一次,嗜中性粒细胞只存活1~2天,子宫内膜周期性脱落,表皮角化细胞不断脱落,基底层细胞不断增生等;病理性再生是指病理状态下细胞、组织缺损后发生的再生。
再生医学研究的对象是病理性再生。
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再生医学(regenerative medicine,RM)原先指体内组织再生的理论、技术和外科操作;现在,它的内涵已不断扩大,包括:
组织工程
细胞和细胞因子治疗
基因治疗
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组织工程最初是用来描述组织体外构建的有关理论和技术;现在,它的内涵也在不断扩大,凡是能引导组织再生的各种方法和技术均被列入到组织工程范畴内,如干细胞治疗、细胞因子和基因治疗,并已广泛用于体内组织再生和体外的组织重建。
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国际再生医学基金会(International Foundation Regenerative Medicine,IFRM)明确把组织工程定为再生医学的分支学科(sub-discipline)但很多情况下,两者常混用。
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再生医学有很悠久的历史,组织工程学的出现,使得再生医学进入了一个新时代。
组织工程被认为是继细胞生物学和分子生物学之后,生命科学发展史上又一新的里程碑,也是一场意义深远的医学革命。
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第一位提出“组织工程学”这一术语的是美藉华裔学者冯元祯(Y.C. Feng)教授。1987年美国国家科学基金会根据冯教授的建议,正式采用“组织工程学”这一术语来描述这一新兴的领域,并正式建立了这门新学科。
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从外科学的发展历程来看,先后经历了三个“R”阶段,即切除(Resection)、修补(Repair)和替代(Replacement)。组织工程学的出现,意味着外科学已进入“再生医学”(Regenerative Medicine)的新阶段,是第4个“R”。
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切除 Resection
修补 Repair
替代 Replacement
再生 Regeneration
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20多年来组织工程经历了两个阶段:前10年主要是证实利用细胞和生物材料构建组织的可行性;后10多年(20世纪90年代初至今),在研究内容、手段、临床试用等方面都有很大的发展,主要进展如下。
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构建组织不再局限于以裸鼠为代表的免疫缺陷型动物模型,而是更多采用与人体结构相近的具有免疫功能的大型哺乳动物模型。
目前,组织工程化骨、软骨、皮肤、肌腱等组织已在猪、羊和犬等大型动物中成功构建,并修复了相应的组织缺陷。
【动物模型】
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不再局限于细胞生物学和动物实验技术,新技术如分子生物学技术、基因克隆技术、转基因技术、移植免疫学技术、干细胞技术、遗传工程技术、生物材料合成与改良技术、生物材料的编织技术、生物力学技术、三维打印技术、影像学技术和生物反应器技术等均用于组织工程研究,从而提高了研究水平,加快了研究速度。
【研究手段】
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种子细胞在体外培养扩增,但随着培养时间的延长,许多细胞会失去重要的表型特征。细胞生物学的发展使得培养条件能有利于细胞增殖,同时保留其表型特点,或是在扩增后恢复其已失去表型的基因表达。
【种子细胞表型特征的保存】
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已由同一种组织构建的种子细胞扩展至其他组织的细胞。例如构建骨组织的种子细胞可用骨髓间充质干细胞来代替成骨细胞;构建肌腱组织可用皮肤成纤维细胞来代替肌腱细胞。
随着免疫学的发展,今后有可能创造出通用型种子细胞。
【种子细胞来源】
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对支架材料的要求应有微孔结构,所需的孔径、孔隙率及微孔分布与走向应随组织不同而变化。
支架材料的化学组成对细胞的附着和浸入的细胞表型表达会产生影响。
【支架材料】
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支架材料在体内组织再生过程中有以下作用
在结构上加强缺损部位的强度;
阻止周围组织长入;
作为体外接种的细胞在体内扩增和增殖的支架;
利用与细胞整合素以及受体的相互作用,作为一种可溶的细胞功能调节因子;
作为细胞、生长因子和基因的生物载体。
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在支架材料的选择上,不仅用传统的单纯高分子可降解聚合物,而且也发展到用纯天然的脱细胞基质材料,或采用多孔可吸收的高分子人工合成材料与天然细胞外基质分子复合的新型材料,如合成的多聚物和钙磷材料,后者有可能成为未来组织工程的主导材料。
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在体外,通过模拟体内环境可以构建出多种不同的组织化工程组织,如皮肤、软骨组织等。其中,灌注型生物反应器(利用动物体表达外源性基因)的应用起到关键作用。
【体外构建组织】
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20世纪90年代,美国FDA已批准组织工程皮肤及自体软骨细胞移植修复关节软骨部分缺损用于临床,并已产业化生产。另有一些产品进入临床试用或临床前研究阶
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